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上海市所在地
商品属性：
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
椎间盘组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7454 |
细胞简介：
大鼠椎间盘髓核分离椎间盘组织；椎间盘是位于脊柱两椎体之间，分为中央部的髓核，富于弹性的胶状物质；周围部的纤维环，由多层纤维软骨环按同心圆排列。上下有软骨板，是透明软骨复盖于椎体上，下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成，位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠，使纤维环成为坚实的组织，能承受较大的弯曲和扭转负荷。髓核，是乳白色半透明胶状体，富于弹性，为椎间盘结构的一部分，位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。婴幼儿时期的髓核含水量为80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生时体积大而松散，位于椎间盘的中央，至成年时位置移至椎间盘的中后部；在成年以前构成髓核的主要物质是大量蛋白多糖复合体、胶原纤维和纤维软骨，随着年龄的增长，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐渐减少，胶原增粗并逐渐被纤维软骨所替代。
方法简介：
公司实验室分离的大鼠椎间盘髓核采用胶原酶-混合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测：
公司实验室分离的大鼠椎间盘髓核经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每3-4天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 梭形、多角形
传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞传代及冻存：
| 细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
| 如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例； 1．细胞冻存时，弃去培养基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，细胞变圆脱落后，加入2ml培养基终止消化，可使用血球计数板计数。 2．1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中，注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3．将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种：
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品：
小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)试剂盒 96T/48T
小鼠单胺氧化酶A（MAOA）试剂盒 96T/48T
小鼠大内皮素(BigET)试剂盒 96T/48T
小鼠催乳素(PRL)试剂盒 96T/48T
小鼠胶原酶I(Collagenase I)ELISA 试剂盒 96T/48T
Human cailage glycoprotein 39 (HC gp-39) ELISA Kit 人软骨糖蛋白39(HC gp-39)试剂盒
Humankillercelllectin-likereceptor,KLRELISAKit 人杀伤细胞凝集素样受体(KLR)试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanai-cytomegalovirusIgGaibody,ai-CMVIgG试剂盒人抗巨细胞病毒抗体IgG(ai-CMVIgG)试剂盒规格：96T/48T
植物基因组DNA化试剂盒(低多糖/酚)50次
Humanα1-Aiypsin,α1-ATELISAKit人α1抗(α1-AT)试剂盒规格：96T/48T
跨膜蛋白酶丝1抗体
锌指蛋白293抗体
EPHA3重组小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein
甲状旁腺激素(PTH)重组蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)
CPLX3重组人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein
EGFL7 Protein Human 重组人 EGFL7 / VE-statin 蛋白
IL1B Protein Canine 重组狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白
甲状旁腺激素(PTH)重组蛋白 Recombinant Parathyroid Hormone (PTH)
EGFL7 Protein Human 重组人 EGFL7 / VE-statin 蛋白
EPHA3重组小鼠 EphA3 蛋白 (aa 569-984) Protein
IL1B Protein Canine 重组狗 IL-1 beta / IL1B 蛋白
CPLX3重组人 CPLX3 / Complexin 3 蛋白 Protein
大鼠椎间盘髓核细胞大鼠载脂蛋白H(APOH)试剂盒 ，英文名： APOH ELISA Kit
Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴细胞因子试剂盒
MouseIerleukin5,IL-5ELISAKIT 小鼠白介素-5(IL-5)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforhumanfrizzledhomolog8,FZD8ELISAKit人卷曲蛋白8
细胞/组织白蛋白载玻片制备试剂盒20次
ELISAKitTIMP-2大鼠基质金属蛋白酶抑制因子2
原代细胞的培养条件：
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗，以尽量除去消化液的毒性；
2、细胞接种时浓度要稍大一些，至少为5×108细胞/L；
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养；
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养；
6、在起始的2天中尽量减少振荡，以防止刚贴壁的细胞发生脱落，漂浮；
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状，应将原代细胞换液；
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时，应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞；
2、短期培养，可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行；
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内，进行分瓶试验；
4、长期培养时，淋巴细胞中要加入生长因子，白血病细胞中要加入少量的原患者血清，以利细胞生长；
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次；
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。
