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上海市所在地
商品属性:
组织来源 | 产品规格 | 细胞形态 | 货号 |
子宫组织 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 成纤维细胞样 | YS-01X7207 |
细胞简介:
大鼠子宫平滑肌分离自子宫组织;子宫是孕育胎儿的器官,位于盆腔中部,膀胱与直肠之间,其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持,这些结构受损或松弛时,可以引起子宫脱垂。子宫肌层比较厚,由成束或成片的平滑肌组成,肌束间以结缔组织分隔。子宫平滑肌具有收缩功能,收缩受激素的调节,其收缩活动有助于向输卵管运送、经血排出以及胎儿娩出。子宫平滑肌层含有大量的血管,如果平滑肌层细胞过度生长,势必造成血管壁的增厚,管腔堵塞,体外培养平滑肌细胞有利于研究子宫和其他富含血管器官的血管形成机制。子宫平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。子宫平滑肌细胞的主要功能:①子宫平滑肌能保持子宫的基本形态,在孕期能的扩张子宫容积,保证胎儿孕育环境;②平滑肌细胞有收缩舒张能力,在生产时能形成生理性的缩腹环,推动胎儿向下移动,辅助生产。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合组织贴块法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠子宫平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞传代及冻存:
细胞传代步骤 | 细胞冻存步骤 |
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。 | 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,细胞变圆脱落后,加入2ml培养基终止消化,可使用血球计数板计数。 2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 |
原代细胞的培养方法一般有以下4种:
① 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
② 消化培养法
③ 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
④器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
公司正在出售的产品:
兔白介素-18(rabbit IL-18) 作用: ELISA 规格: 进口分装
兔免疫球蛋白G(rabbit IgG) 作用: ELISA 规格: 进口分装
兔免疫球蛋白M(rabbit IgM) 作用: ELISA 规格: 进口分装
兔免疫球蛋白E(rabbit IgE) 作用: ELISA 规格: 进口分装
小鼠Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA 试剂盒 96T/48T
Rat cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 大鼠细胞周期素D3(Cyclin-D3)试剂盒
HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit 人苯诺龙/苯去(NP)试剂盒 96T/48T 进口分装
HumanconcanavalinA,ConA试剂盒人刀A(ConA)试剂盒规格:96T/48T
组织CDK5/P25激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISAKit人蛋白酶3抗体(PR3Ab)试剂盒规格:96T/48T
磷酸化Ets转录因子家族ets1抗体
信号通路Wnt3a抗体
GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein
Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)
IL7R重组人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein
ICAM5 Protein Human 重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 标签)
HRG Protein Human 重组人 HPRG / HRG 蛋白
Thioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原 0.5mgThioster-containing protein 1 硫酯包含蛋白-1(抗原)
ICAM5 Protein Human 重组人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (Fc 标签)
GAG-P24重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype C, strain 92BR025) Protein
HRG Protein Human 重组人 HPRG / HRG 蛋白
IL7R重组人 IL7RA / CD127 蛋白 Protein
大鼠子宫平滑肌细胞大鼠原激活蛋白激酶14(MAPK14)试剂盒 ,英文名: MAPK14 ELISA Kit
Mouse advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒
Ratadiponectin,ADPELISAKit 大鼠脂联素(ADP)试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforHHCII(umanheparincofactorII)ELISAKit人肝素辅因子Ⅱ
细胞S6KINASE激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次
ELISAKitCⅠCP大鼠Ⅰ型前胶原C末端肽
原代细胞的培养条件:
一、静置贴壁细胞(包括半贴壁细胞的培养)培养
1、细胞要通过充分漂洗,以尽量除去消化液的毒性;
2、细胞接种时浓度要稍大一些,至少为5×108细胞/L;
3、培养基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培养;
4、 胎牛血清浓度为10%-80%
5、应在37℃5% CO2的培养箱中培养;
6、在起始的2天中尽量减少振荡,以防止刚贴壁的细胞发生脱落,漂浮;
7、待细胞基本贴壁伸展并逐渐形成网状,应将原代细胞换液;
8、用骨髓或外周血中的悬浮细胞经静置培养1周时,应将细胞悬液经低速离心后换液。
二、悬浮细胞培养
1、原代培养时要尽量去除红细胞;
2、短期培养,可在含10%小牛血清的RPMI1640培养基中进行;
3、细胞浓度可在5-8×109/L范围内,进行分瓶试验;
4、长期培养时,淋巴细胞中要加入生长因子,白血病细胞中要加入少量的原患者血清,以利细胞生长;
5、细胞换液一般每隔3天需半量换液一次;
6、细胞传代一般待细胞增殖加快、细胞密度较高时才能进行。