Cell Cycle Chromobody Immunodetection Vector

Cell Cycle Chromobody Immunodetection Vector

使用细胞周期染色体体实时观察细胞周期动力学

稳定表达与绿色荧光蛋白TagGFP2融合的细胞周期染色体的HeLa细胞系。

稳定表达与红色荧光蛋白TagRFP融合的细胞周期染色体的U2OS细胞系

上面的面板显示了细胞周期染色体抗体-GFP2在36小时的时间过程中清楚地跟随细胞的过程，在此过程中细胞经历了两轮分裂。次分裂后，子细胞在10小时左右进入S期，显示出PCNA的特征点状模式。29小时标记显示其中一个子细胞进入有丝分裂（前期），第二个紧随其后的是在第30小时。对于活细胞成像，将细胞接种在ibidi µ-玻片中。时间序列是在配备有63x / 1.4 NA Plan-Apochromat油浸物镜以及加湿，受温度和CO2控制的活细胞室的旋转圆盘显微镜（UltraVIEW VoX，PerkinElmer）上获得的。TagGFP2用488 nm激光线激发通常在100-500 ms /图像之间，激光强度设置为max。25％。每30分钟以1000×1000像素的帧大小，100 nm的像素大小和400 nm的z步长大小记录活细胞的共聚焦图像z堆栈。所显示的图像是几个Z轴中间部分的大强度投影。