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TDzyme Tissue Dissociation Kits
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面议Pair-N-Share 细胞配对串联共培养孔
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面议Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
Dnmt1 Chromobody Immunodetection Vector
Dnmt1染色体体的小尺寸可产生高信噪比,以产生令人震惊的高分辨率图像或染色质甲基化动力学的定时电影。值得注意的是,它对甲基化模式没有影响,并且在大多数细胞类型中均表现出极低的毒性。只需用Dnmt1 Chromobody质粒转染您选择的细胞系即可。该质粒包含与TagRFP或TagGFP(Evrogen)融合的Dnmt1特异性羊驼抗体的序列。转化后,您的细胞将表达Dnmt1染色体抗体。由于荧光体分子特异地定位于DNA甲基转移酶,因此细胞核将发出扩散和点状的荧光。
用Dnmt1-Chromobody质粒转染HeLa细胞,并在生长和分裂过程中对其进行观察。每30分钟对细胞成像24小时。抗Dnmt1-TagRFP染色体抗体将DNA甲基转移酶与细胞核结合。在G期细胞中,信号通过细胞核和细胞质均匀分布。随着时间的流逝,在S期,颗粒以复制灶的形式出现在细胞核中,后颗粒消失,细胞分裂。
在整个细胞周期中,Dnmt1-Chromobody转染HeLa细胞的静态图像。这次,使用抗Dnmt1-TagGFP融合蛋白,随着细胞通过S期,复制灶的形成可以看成亮绿色的点。Dnmt1-Chromobody不影响正常细胞功能。
纳米抗体是*的小抗体片段,表现出与靶蛋白的超高效结合。在动物细胞中表达的纳米抗体可以被收集并用于体外研究。当纳米抗体表达为与报告分子(例如GFP)的融合体时,发生了一些出乎意料的事情。新形成的染色体抗体直接与目标细胞内的靶标结合。而且,使用正确的载体和启动子,结合具有高特异性和低背景。这为GFP-融合与感兴趣的蛋白质的免疫定位研究提供了*的选择。为什么?因为已经显示了GFP和RFP融合可以阻断或改变融合蛋白的活性。相反,