登革热是由登革病毒引起的病毒性感染，人体在感染后会产生抗体来对抗病毒。登革病毒IgG抗体检测试剂盒是一种用于检测人血清中登革病毒IgG抗体水平的诊断工具。

人登革病毒IgG抗体检测试剂盒基于酶联免疫吸附法(ELISA)原理，将包含登革病毒抗原的试剂盒中的试纸板与被检测血清样本反应。如果血清中存在登革病毒IgG抗体，则这些抗体将结合到试剂盒中的病毒抗原上。接下来，添加特定的酶标记二抗，它将结合到已经与病毒抗原结合的IgG抗体上。最终，加入底物，酶催化反应后会产生颜色变化，颜色深浅程度与样本中IgG抗体水平成正比。根据颜色变化可以判断被检测样本是否存在登革病毒IgG抗体，且可以估算出其相对水平。

一、组成：

二、样本处理及要求：

样本处理要求：

1.采集血清样本，禁食8小时以上后取空腹静脉血。

2.将血清离心10分钟，收集上清液作为检测样本。

3.样本处理前应小心操作，避免污染和杂质干扰。

4.如不能及时处理，建议在-20℃以下保存，但不要反复冻融。

检测要求：

1.按照说明书中的方法进行操作，确保每一步操作都正确无误。

2.注意正负对照组的设置。

3.建议使用双盲法进行检测结果的解读。

4.结合临床症状和其他检查结果进行全面分析。

三、人登革病毒IgG抗体检测试剂盒操作步骤：

1. 从冰箱中取出试剂盒，让它在室温下平衡10-30分钟。

2. 将标准品和患者血清标本放在室温下，等待达到室温。

3. 打开试剂盒袋子并将试剂盒标签与样本标签匹配。

4. 取出微孔板并用反应单元涂层洗涤缓冲液(Wash buffer)洗涤每个孔。吸干溶液后重复此步骤两次。

5. 加入100μL标准品或患者血清样本到微孔板的相应孔中。

6. 在孔盖上加封板密封膜，并在37°C下孵育60分钟。

7. 移除密封膜，倒去液体并在三杯洗涤器中用Wash buffer洗涤每个孔。吸干溶液后重复此步骤五次。

8. 加入100μL HRP-IgG检测抗体到每个孔中，在37°C下孵育30分钟。

9. 移除密封膜，倒去液体并在三杯洗涤器中用Wash buffer洗涤每个孔。吸干溶液后重复此步骤五次。

10. 加入100μL TMB底物到每个孔中，在室温下暴露15分钟至30分钟。

11. 加入100μL停止溶液到每个孔中，用洗涤器清洗板子，并立即读取OD值。

注意事项：操作过程中要注意避免试剂的污染，严格按照说明书上的方法进行操作，并使用符合规定的质控标准。

四、注意事项：

1. 检测前需遵循操作规范和生物安全规定，佩戴好实验室个人防护装备。

2. 样本采集应按照标准程序进行，确保样本质量可靠。

3. 检测前需要将试剂盒中的所有试剂和样本达到平衡温度。

4. 严格按照说明书操作，不得随意更改检测步骤或参数。

5. 检测结果需结合临床表现、病史和其他检测指标进行综合分析和判断。

6. 阴性结果不排除感染可能，仍需结合相关因素进行判断。

7. 此检测只能用于研究和临床诊断，不能作为疫苗效果评价的依据。

五、计算：

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

六、试剂盒性能：

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内变异系数与批间变异系数应分别小于10%和15% 。

七、保存条件及有效期：

1.试剂盒保存：2-8℃。

2.有效期：6个月。