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微图案
控制细胞的 2D 形状
微图案
细胞在具有预定义几何特征的粘附微米大小区域图案的基底中培养。当在其上培养时,细胞会特异性地粘附在图案区域,例如获得图案的几何形状。
细胞培养支持物使用抗氧化抗粘附 聚合物 进行共价结合的表面化学处理。与与载玻片具有相同类型共价键的经典聚合物相比,对氧化的敏感性较低。电镀后,您可以将细胞保持在图案中长达 2 周。未使用的基材可储存长达 6 个月。
> 不同的图案形状和尺寸(线条、正方形、三角形、矩形、网格等)
> 定制的形状和尺寸
> 适用于任何细胞培养基质(从培养皿到 384 孔板)——从单细胞到高通量和高内涵筛选分析
> 与高分辨率光学显微镜系统兼容
动态微图案
Dynamic Explorer 结合了 4Dcell 的微图案技术和点击化学,以诱导细胞从预定义的几何形状迁移。
细胞被播种在微图案基板上,并以非常高的分辨率专门粘附在细胞粘附区域上。细胞周围的区域起初是非粘性的,但可以随时“打开”以将细胞从它们的图案中释放出来。
与标准微图案一样,可以将细胞图案化为定制的形状和尺寸。
> 抗粘聚合物
与载玻片共价和静电键合,稳定长达 3 个月
聚合物可以通过点击化学反应变得具有粘性
正方形微图案多孔板 微图案盖玻片
细胞形状控制和标准化、细胞器定位表征、细胞成熟和分化、迁移区域限制、细胞重编程、蛋白质微模式等。
宽度为 100 到 10 ?m 的 HeLa 细胞
荧光标记的纤维蛋白原——Alexa Fluor 488
探索应用示例
> 肝小管试验:改进的肝细胞分化模型
> 井中的神经网络:神经元连接的控制
> 附加球体测定:改进球体的操作和观察
> 2D 心肌细胞成熟试验:功能性 IPSc 诱导的心肌细胞纤维
> 心肌细胞成熟试验:功能性 IPSc 诱导的心肌细胞纤维
> 细胞迁移测定:迁移 过程中发生的机制分析
> 细胞极化:细胞 形状和组织的标准化
> 共培养测定:通过点击化学技术分析细胞-细胞接触
> 受挫的吞噬作用:机制的表征
> 片状伪足和丝状伪足检测:分析膜突出期间发生的事件
> 活细胞成像:通过延时显微镜观察细胞
> 巨噬细胞极化测定:通过细胞形状调节巨噬细胞表型
> 微管依赖性运输测定:细胞骨架组织的细胞限制
> 细胞器定位分析:统计细胞器在细胞中的定位
> 初级纤毛测定:纤毛发生调控的细胞形状控制
> 骨骼肌细胞测定:排列、组织和形状标准化
> 抗粘聚合物
与载玻片共价和静电键合,稳定长达 3 个月
聚合物可以通过点击化学反应变得具有粘性
Dynamic Explorer 结合了 4Dcell 的微图案技术和点击化学,以诱导细胞从预定义的几何形状迁移。
细胞被播种在微图案基板上,并以非常高的分辨率专门粘附在细胞粘附区域上。细胞周围的区域起初是非粘性的,但可以随时“打开”以将细胞从它们的图案中释放出来。
动态微图案技术
在使用动态微图案的典型实验中,可以使用实时成像工具或通过在不同时间点获取图像来实时监测细胞迁移。然后对图像进行处理和分析,以确定细胞占据的基板面积作为时间的函数。
通过测量不同时间点扩散细胞所占的面积,可以量化从圆形图案中的细胞迁移。
先,使用 imageJ 内置的“滚动球”算法从图像中减去背景。这允许增强细胞和背景之间的对比度并纠正不均匀的照明。
然后,使用“ColorToGray”CellProfiler 模块将图像转换为灰度图像。然后将“平滑”模块应用于灰度图像以去除伪影。
接下来,'IdentifyPrimaryObjects 和“MeasureImageAreaOccupied”模块相继应用。
个将图像上的特征分为两类:对象和背景,其中单元格对应于对象。后者测量图像上先前计算的对象所占据的面积。
探索应用示例
> 如何使用图像处理通过 4DCELL 测定法测量圆盘状细胞迁移?
> 如何使用图像分析测量伤口随时间的闭合情况?
使用 4DCELL 动态微图案盖玻片设置伤口愈合测定。
这个简单的例子说明了如何使用 4DCELL 动态微图案来监测小细胞群从初始圆形图案的迁移。在处理过的样品上,500 um 圆之外的迁移稳步增加。
24 小时后,细胞已迁移到帧的 43%。
在 4 和 8 小时,圆圈的扩散主要是由迁移引起的,与细胞增殖相比,这个过程具有更短的时间尺度。
一段时间后,增殖和迁移的结合放大了细胞在基质上的扩散。
有趣的是,细胞在迁移时保持非常规则的圆形。
技术概述
> 使用微模式模拟心肌收缩
> 由微图案蛋白质底物引导的细胞迁移
> 神经组织工程:基质刚度调节神经元网络的形成和活动
> 回顾 – 微图案
技术概述
> 使用微模式模拟心肌收缩
> 由微图案蛋白质底物引导的细胞迁移
> 神经组织工程:基质刚度调节神经元网络的形成和活动
> 回顾 – 微图案