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分光光度法 50管/48样
注意:正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
H2O2 是生物体内最常见的活性氧分子,主要由 SOD 和 XOD 等催化产生,由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2 可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面H2O2 也是许多氧化应急反应中的关键调节因子,。
测定原理:
H2O2 与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在 415nm 有特征吸收。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、丙酮 60mL、浓盐酸 10mL、研钵和冰。
试剂的组成和配制:
试剂一:丙酮 60mL×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存;临用前加入 10mL 浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂 4℃保存;(溶解时间较长,约 30min,可 40℃-60℃加热溶解,务必提前准备)
试剂三:15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:60mL×1 瓶,4℃保存;