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转染试剂Lipo3000
产品货号:TR002
存储条件:2-4℃保存1年。(避免冷冻)
产品说明
LABLEAD Lipo3000试剂采用了脂质纳米颗粒(Lipid Nanoparticle)LNP递送技术, 利用脂质形成纳米微粒将核酸包裹起来形成核酸脂质纳米粒,实现高转染性和可重复性的实验结果。其可针对广泛类型的常见及难转染细胞,实现超高转染效率,同时提供更高的细胞活力。Lipo3000对大多数细胞毒性低并且性质温和,并且我们优化了转染过程的全部四个步骤,并结合脂质体纳米颗粒(LNP)递送技术,实现了较高的转染性能并可以降低所需的试剂量,同时尽可能降低对细胞系产生毒性的风险。对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率;转染时血清的存在不影响转染效率的优点。
适用范围:贴壁细胞和悬浮细胞(哺乳动物细胞系)的转染。
产品特点:
1) 卓yue的转染效率—针对较难转染细胞,可将效率提升2~10倍
2) 作用温和,细胞毒性低—可改善细胞活力
3) 高性价比高,同时实现更好的转染结果
使用方法
DNA的转染
对大多数细胞来说,转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平,并能减少细胞毒性。
1.接种细胞至70-90%汇合度时转染。
2.按照下表使用Opti-MEM培养基稀释Lipo3000-B试剂(建议同时用2管),充分混匀
3.使用Opti-MEM培养基稀释DNA,制备DNA预混液,然后添加Lipo3000-A 试剂,充分混匀。
4.在每管已稀释的Lipo3000-B试剂中加入稀释的DNA (1:1比例)。
5.室温孵育5分钟。
6.加入DNA-脂质体复合物至细胞中。
7.37℃孵育细胞2-4天。然后分析转染细胞。
siRNA转染
转染siRNA至细胞中时,遵循如上所述的DNA实验方案,但在稀释siRNA时不要加入Lipo3000-A试剂(第3步)。
细胞培养容器 | 96-well | 24-well | 6-well | |
贴壁细胞 | 1~4×104 | 0.5~2×105 | 0.25~1×106 | |
Opti-MEM培养基稀释Lipo3000-B试剂(建议同时用2管) | Opti-MEM培养基 | 5ul×2 | 25ul×2 | 125ul×2 |
Lipo3000-B | 0.15和0.3ul | 0.75和1.5ul | 3.75和7.5ul | |
Opti-MEM培养基稀释DNA,制备DNA预混液,然后添加Lipo3000-A试剂,充分混匀 | Opti-MEM培养基 | 10uL | 50ul | 250ul |
DNA (0.5–5 ug/ul) | 0.2ug | 1ug | 5ug | |
Lipo3000-A试剂(2 ul/ug DNA) | 0.4ul | 2ul | 10ul | |
Lipo3000-B试剂中加入稀释的DNA (1:1比例) | 稀释的DNA | 5ul | 25ul | 125ul |
稀释的Lipo3000-B | 5ul | 25ul | 125ul | |
室温孵育5分钟 | ||||
加入DNA-脂质体复合物至细胞中 | 96-well | 24-well | 6-well | |
DNA-脂质体复合物 | 10uL | 50ul | 250ul | |
37°C孵育细胞2–4天。然后分析转染细胞。 |
特别提醒:
本公司所有产品仅供专业人员用于生命科学研究,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅。
常见细胞的转染效率(仅供参考,实验条件不同转染效率会有较大差别)