LabFect SP悬浮细胞小核酸转染试剂

货号：T1024

存储条件：蓝冰运输，4°C 保存，超一个月不用于-20°C储存，-20℃保存条件下，有效期为 1 年。避免反复冻融。

产品特点：

卓yue的悬浮细胞转染性能：细胞转染阳性率一般在75%以上，基因敲除效率在80%以上；

极低的细胞毒性：转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响；

转染细胞范围广，绝大多数悬浮细胞都能获得比较理想的转染结果。

产品介绍

LabFect 可用来转染 siRNA、miRNA mimics、miRNA inhibitor 等 200bp 以内的小分子 RNA，可转染绝大多数悬浮细胞。目前， 无论国外还是国内，悬浮细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的悬浮细胞小核酸转染试剂。LabFect 能够高效转染绝大多数悬浮细胞，获得比较理想的基因敲除效果。对于大多数悬浮细胞，LabFect 的细胞转染阳性率都在 75%以上，而转染细胞死亡率不到10%。LabFect 的使用也极其简便，先将 sRNA 与 LabFect 室温混合，再将siRNA-LabFect 混合物直接加入含培养基的细胞，血清对转染效果没有影响，不必刻意添加或更换培养液。

应用：

siRNA 转染

antisense RNA 转染

200bp 内的小分子 DNA 转染

质量控制

本产品经严格的质量检验证明，无生物污染。

操作步骤：本说明书适用于24孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。 

1. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔500 μl培养基，使细胞在转染时密度在30-50%，尽量不要使用抗生素。

2.  siRNA-Labfect SP混合物准备：

2.1  6pmol siRNA 用 50μl 无血清培养基稀释。

2.2  2μl Labfect SP用 50μl 无血清培养基稀释。轻轻混匀，室温孵育 5min。

注意：确保在 25 min 内执行第三步操作，不要过于延迟。   

2.3 孵育 5min 后，将 siRNA 稀释液与 Labfect SP稀释液混合（总体积 100μl）。轻轻混匀，室温孵育 20 min。

3.  将混合物加到培养的细胞内（*培养基培养）：

3.1  将100μl混合物加入培养孔内，培养孔内含有 0.5ml 培养的细胞。轻轻晃动培养板 5min，混匀。

3.2  37°C培养48-72h，检测基因抑制效果。如果需要，细胞培养4-6h时可以更换培养基，但不是必须。孵育时间的长短，取决于细胞类型、 所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最jia孵育时间。

注意事项:

1. 悬浮细胞转染难度较大，首ci转染时，请务必对转染条件进行优化。例如：24 孔培养板，可进行如下交叉实验：

2. 转染时，细胞生长状态应保持良好，密度不能过大，培养液尽量不要使用抗生素，否则会导致细胞死亡增加。

3. 为了提高转染效率，转染后培养板可放于微型振荡器上培养或每隔 1 小时人工晃动 1 次。

LabFect Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels