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G25 脱盐离心柱(0.7ml)
货号:M1607
存储条件:4-30度保存
产品简介
LABLEAD G25离心脱盐柱的介质是一类以葡聚糖为基质的凝胶过滤层析介质,其工作原理主要是利用具有网状结构的葡聚糖凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。G25离心脱盐柱,对盐和小分子的滞留率在95%以上,几乎等体积回收,样品不会被稀释可以在出色地完成蛋白质脱盐的同时保持ji高的回收率。无需装柱代替比较耗时的传统透析处理,以达到快速纯化蛋白质/替换蛋白质缓冲液的目的。只需简单的几次离心,即可完成样品的脱盐或缓冲液置换实验。
性能 | 指标 |
装填介质 | Chromrose G25 |
装填体积 | 0.5ml |
最大上样量 | 200ul |
脱盐效率 | >85% |
排阻体积 | Mr5000 |
工作pH | 2~13 |
产品用途
1、脱盐
将蛋白质同其他盐类小分子分离开来,广义的脱盐还包括去除其他的化学小分子,包括咪哗、GSH、苯fen等。
2、缓冲液置换
将蛋白溶液从现有溶液置换到更合适的缓冲液中。比如离子交换、电泳等应用的前处理。
3、样品清除
将样品中的某些组分去除,避免对目标产物的影响,包括质谱样品预处理、化学交联或标记单体的去除等等。
产品特点
1、操作方便,免去了繁琐的透析过程,10分钟内即可完成样品处理。
2、建议一次性使用(也可再生后重复使用),稳定性好,在所用常用缓冲液体(PBS,Tris-Cl、碳酸钠一碳suan氢钠等)中稳定。
操作步骤
提前准备1.5mL或2mL离心管当做收集管。
1、平脱盐柱
1)将离心脱盐柱下方堵头去除,先向一个方向轻微扭转,再向另一个方向扭转,然后放回收集管中,1000xg离心1分钟,倒掉收集管中保护液。
2) 将离心柱重新放回收集管中,向离心柱中加入250ul平衡液(样品脱盐后想要置换的缓冲液),静置待平衡液全部渗入填料后,1000xg离心1分钟,重复三次,去除收集液。
2、样品处理
将离心柱放入干净的EP管中,加入100ul~200ul样品,静置3min,1000xg离心1分钟,EP管中溶液即为脱盐后的样品。
3、脱盐柱的再生和保存将使用过的脱盐柱,加入300ul 0.5M NaOH溶液,静置2min,1000xg离心1min,重复两次。然后加入300ul去离子水,静置2min,1000xg离心1min,重复三次。将处理好的脱盐柱,加入20%乙醇溶液,下端放上红色堵头,拧紧盖子4~30°C保存即可。
回收效果
样品脱盐后的回收率与样品的浓度,以及上样体积相关。样品浓度越高,其回收率越高;同时在推荐的样品上样量范围内,上样量越大,其回收率也会随之升高。通常脱盐后蛋白的回收率在80%~95%。
注意事项
1、为了防止可能的离子相互作用,建议在脱盐期间和最终样品缓冲液保持低盐浓度(25mM NaCl)。如果需要避免NaCl的存在可以使用挥发性缓冲剂,例如100mM乙酸铵或100 mM碳酸氢铵;
2、样品处理量要在柱子处理范围内,过多会导致脱盐不wan全,过少会导致样品回收率下降;
3、填料在高浓度醇溶液或饱和盐溶液中会有失水收缩现象,请勿将上述溶液进行过柱;
4、加样时尽量均匀加至管中心位置;
5、当样品浓度过低时,需先将样品浓缩到所需体积或所需浓度。