反转录试剂盒（Primer Flexible）

产品货号：F0202O

存储条件：-20°C

产品组分：

产品简介

RTase III Primer Flexible All-in-One Mix是一款高效、便减少污染的高质量一链cDNA合成预混液， 包含M-MLV GIII Reverse Transcriptase及其反应 Buffer、RNA 酶抑制剂、dNTPs等一链 cDNA 合成所需的多种组分，还需加入RNA 模板、引物和水即可开始反应，操作非常方便。针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物，满足多样化的实验需求，可根据不同实验场景选择Oligo(dT)20VN 或Random hexamers 或 Gene Specific Primers。使用该逆转录预混液 15 分钟内最长可获得12 kb大小的cDNA。

使用方法

1.于冰上配制如下反应体系：

a.推荐使用试剂盒提取的已去除基因组 DNA 污染的高质量 RNA 作为模板。

2.轻柔吸打混匀，瞬离；

3.55℃温育 15 min；

注：若目标 RNA 不含 Poly(A) 结构，可预先 25℃温育 10 min。

4.反应结束后，85℃温育 5 min 以终止反应；

5.将获得的cDNA 溶液置于冰上，用于后续实验；或立即保存于 -20℃。

注：

1.后续实验为克隆实验，若RNA 来源于真核生物，只需使用 Oligo (dT) VN 即可， 加入 Random hexamers 会降低全长 cDNA 的产量；若 RNA 来源于原核生物，只需使用 Random hexamers 或 Gene Specific Primers。

2.后续实验为qPCR，请同时加入Oligo(dT) VN和Random hexamers以获得mRNA不同位置逆转录效率均一的cDNA。

注意事项

为了防止 RNase 污染，请保持实验区域洁净；操作时需穿戴干净的手套、口罩；实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证 RNasefree。