YOBIBIO/攸碧艾 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
干细胞专用胎牛血清 细胞培养试剂
¥5400无血清冻存液 用于细胞培养 细胞冻存
¥268Nabact Rid(黑胶虫去除试剂)细胞卫士
¥1950Savelt™(支原体清除剂)细胞卫士
¥945Nocard Prevention支原体预防试剂 细胞卫士
¥195MycoTest Kit(支原体检测试剂盒)细胞卫士
¥450Calcein-AM/PI活死细胞染色试剂 细胞培养
¥468OPTI-MEM培养基(含酚红) 细胞培养试剂
¥501PBS缓冲液 ph7.4 细胞培养试剂
¥49DMEM/F12培养基 细胞培养试剂
¥49RPMI1640培养基 细胞培养试剂
¥48胰蛋白酶-EDTA消化液 细胞培养试剂
¥84产品特点:
提供优良的性能,以针对难转染的细胞系实现了较高转染效率的试剂
转染试剂对细胞作用温和,毒性很低
相比其他转染试剂具有更高的转染效率和更低的用量 适用细胞更加广泛,有效转染难于转染的细胞系
能有效转染的细胞类型包括:
肺癌细胞(A549、NCI-H460)骨肉瘤细胞(U-2 OS、Saos-2)
结肠癌细胞(Caco2、SW480)胰腺癌细胞(PANC-1)
皮肤黑色素瘤细胞(SK-MEL-28)成纤维细胞(3T3、COS-7)
肝细胞(HepG2、HuH7)红白血病细胞(K562)
乳腺癌(MCF7、Hs578T)前列腺癌(LNCap)
成肌细胞(C2C12、L6 CRL-1458)
产品规格:
(备注:以下为常用规格,更多规格可根据客户需求定制)
储存事项: 冰袋或者湿冰运输,短时间内可室温运输,但需避免光源热源。
长时间储存于 4℃,切勿冻存,有效期24个月。
产品用于:仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性,本说明书操作说明仅供参考,最终解释权归本公司所有。
警告!产品对人体危害性未知,请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套!如果不小心接触,应立即用大量的水冲洗,如引起身体不适应前往医院治疗。
注意事项: 转染siRNA至细胞时,遵循如上所述的DNA实验方案,但在稀释siRNA 时不要加入 B-300试剂。在无血清培养基中制备 DNA-U33-300复合物,直接将其加入含细胞培养基的细胞中。(有无血清或抗生素均可 ) 转染后无需去除转染复合物或者更换/添加培养。 整个实验过程避免细胞污染,由于不同细胞耐受性不同,我们建议您在做批量实验前,可根据实际质粒和细胞的转染效率,分不同梯度量先做预实验,摸索良好DNA和U33-300 Transfection Reagent的混合比例。步骤里面测试推荐的两种浓度的并非固定浓度,优化后可根据自身细胞情况调整用量。
操作步骤:
(以六孔板的贴壁细胞DNA转染为例) 细胞准备。
1.转染前一天将细胞接种至六孔板内,细胞接种数量视其生长速度和细 6 胞系类型而定,一般为0.5-1×10 个细胞。
2.转染时要求细胞生长的汇合度为70~90%,转染前两小时对细胞进行换液。(细胞状态与转染效果影响很大,选择良好的细胞状态更有利于转染效率提高和转后细胞状态的恢复) 将3.75 μl和7.5 μl 的U33-300分别加至另外125 μl无血清的OPTI-MEM培 养基中,轻轻混匀,室温静置2-3分钟。
3. 将5 ug 质粒DNA (0.5-5μg/μL) 加入到250μl无血清OPTI-MEM培养基稀释,制 DNA 预混液匀,然后添加10 ul B300 试剂并充分混匀。
4.在每管已稀释的U-300试剂中加入等体积稀释的 DNA孵育10-15分钟。
5.将DNA和U33-300混合液滴加至六孔板的孔内,前后左右晃动孔板混匀,置于培养箱中培养。
6.转染18-48小时后,倒置荧光显微镜下观察荧光蛋白表达,或加入抗性培养基筛选稳定表达细胞系单克隆。
用量参照表: