产品介绍：
YobibioTrans R-100 RNA Transfection Reagent是一种特别的RNAi特异性阳离子脂质体转染试剂，本品推荐用于将siRNA、microRNA(miRNA)、mimic、inhibitor 等小片断RNA 转染入动物细胞（包括各种细胞系、原代细胞、悬浮细胞、昆虫细胞等）。本品可以常温运输，本品在多种细胞系的验证中均表现了很好的RNA 转染效率，并有很低的细胞毒性。
特点：

1，超高的转染效率，且所需 RNAi 浓度低，基因抑制效果更好，非特异性效应极少
2，针对 miRNA 拮抗剂和模拟物具有出色的转染效率 ·细胞毒性低、易于优化
3，可用于多种细胞类型
4，简单、高通量的即用型转染

规格包装: （备注：以下为常用规格，更多规格可根据客户需求定制）
    
储存事项：冰袋或者湿冰运输，短时间内可室温运输，但需避免光源热源，长时间储存于 4℃，切勿冻存，有效期 24 个月。
重要提示：
产品用于：仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
由于实验受多种因素影响具有不确定性，本说明书操作说明仅供参考，最终解释权归本公司所有。
警告！产品对人体危害性未知，请遵循操作说明。穿戴适当的防护眼镜、衣服和手套！如果不小心接触，应立即用大量的水冲洗，如引起身体不适应前往医院治疗。
注意事项
•整个实验过程避免细胞污染由于不同细胞耐受性不同，由于不同细胞耐受性不同，我们建议您在做批量实验前，可根据实际质粒和细胞的转染效率，分不同梯度量先做预实验，摸索最佳 siRNA 和 YosiTrans R-100 的混合比例。优化后可根据自身细胞情况具体用量。
•采用本品进行转染，RNA 用质量(ug)进行计量，对21nt 双链的siRNA 来说，1OD=3.0nmol=40ug。
•siRNA 等较短RNA 请参照表1 中siRNA 用量，mRNA、shRNA 等较长RNA请参照表1 中mRNA 用量。
•如转染后需要用Trizol 提取RNA，建议转染后6 小时换液。
操作步骤 (不同的细胞已及转不同面积的孔板操作起来略有不同，以 24 孔板 siRNA 转染为例)
1.提前一天细胞种植 贴壁细胞：提前一天将细胞种植在24 孔板中，以转染时细胞汇合度在30％左右为宜，转染前全培养基总量为0.45ml。 
悬浮细胞：采用对数生长期的细胞，数量为常规培养细胞数的1/3 进行转染实验。
2.转染过程
⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入无血清稀释液，充分混匀，制成RNA稀释液，终体积为25μl。
注意：无血清稀释液建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM 或1640。
⑵取1ul 的R100，然后加入24ul 无血清稀释液体，充分混匀，制成R100 稀释液，终体积为25μl。室温静置5 分钟。
⑶将R100 稀释液和RNA 稀释液充分混合（可用振荡器振荡或用加样器吹吸10 次以上）混合，室温静置15 分钟。转染复合物制备完成。
⑷将50μl 转染复合物滴加到有0.45ml 全培养基（可含10%血清和抗生素）的细胞上，混合均匀。
⑸转染后6 小时观察细胞状态，如状态良好可不必更换培养基，继续培养24-96小时得到结果。 
注意：
1.siRNA 转染后，继续培养24-72 小时在mRNA 水平得到结果，继续培养24-96 小时在蛋白水平得到结果。mRNA 转染后，根据需要在24 小时后得到结果。
2.由于血清和培养条件等差异，转染后镜下培养基中可能出现少量黑点状沉淀，为转染试剂和血清中蛋白结合产物，不影响转染结果和细胞状态，可通过换液除去。

4.优化 由于RNA 序列差异、合成条件不同以及是否带有荧光等标记，决定了RNA 和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件，建议先进行预实验优化。下表列出了在24well 的优化方案，供参考。 
RNA 浓度和转染试剂量的优化(24well)

根据优化实验结果，固定RNA(μg):转染试剂量(μl)的比值，按培养器皿表面积比例应用到其他培养容器。

本公司所有产品仅供科研使用