Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR
(gDNA digester plus)
—— Yeasen第三代逆转录酶预混液，高质量cDNA的*！
研发背景
RT-qPCR是一个多步骤连贯实验，逆转录的实验结果只能通过后续qPCR进行判定，因此这一过程的成功与否十分关键。实验过程中，你是否有遇到过这些问题？
1.逆转录效率低导致后续qPCR实验结果Ct值偏大？
2.RNA具有复杂二级结构或GC含量高导致逆转录失败？
3.逆转录产品组分多，加样麻烦误差还大？
。。。。。。
Hifair® Ⅲ SuperMix，让逆转录实验更方便、更！
Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)是基于翊圣Hifair® Ⅲ Reverse Transcriptase而开发的即用型预混液。该产品可耐受高达65℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录；同时增强了与模板的亲和力，非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。
产品带基因组DNA去除成分，适用于两步法RT-qPCR检测，针对qPCR进行特别优化，比例优化的Random primers/ Oligo (dT)18 primer mix，使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始，并具有相同的逆转录效率，zui大程度保证了qPCR结果的真实性和可重复性。
产品特点
1.耐热性
耐受65℃，适合高GC及具有复杂二级结构的RNA模板
2.逆转录
相对市面同类产品具有更高的逆转录效率
3.宽广的线性检测范围
在宽广模板范围内（Total RNA 10pg-5μg）均可合成cDNA
4.去除基因组残留
试剂盒自带组分可去除残留基因组，且无需额外失活操作
5.模板投入量
RNA投入量多可加12μL，有利于低浓度模板检测
6.操作简便性
基因组DNA去除与逆转录均设置成mix形式，加样方便，移液误差小
7.反应时间
逆转录时间15min，反应总时间低于半小时
产品应用
两步法RT- qPCR检测。
产品性能
1.反应温度55℃，耐受65℃高温
反应温度55℃可满足常规模板及二级结构模板的逆转录，高GC模板可适当提高到65℃反应
2.出色的逆转录效率，适合不同GC含量、不同表达丰度的基因
针对不同GC含量、不同表达丰度的基因，Hifair® Ⅲ SuperMix相对市面同类产品具有
更高的逆转录效率
3.宽广的模板线性范围内均可合成cDNA
Hifair® Ⅲ SuperMix在很宽的模板范围内均可合成cDNA。Total RNA投入量为5pg-5μg，逆转录按说明书标准程序进行，所得cDNA进行qPCR检测。
GAPDH：E=98.47%，R2=0.998；RPS2：E=98.79%，R2=0.998；
AGTPBP1：E=100.08%，R2=0.998；GLUD1：E=100.35%，R2=0.998。
4.去除基因组残留
仅使用试剂盒自带的gDNA digester Mix就可以去除RNA模板中残留基因组，且无需失活操作，Hifair® Ⅲ SuperMix可充分抑制gDNA digester活性。
Positive control：25ng Mus gDNA作为模板进行qPCR检测。
实验1：25ng Mus gDNA，按说明书标准程序进行gDNA去除后逆转录，所得产物进行qPCR检测。
实验2：25ng Mus gDNA，同时加入gDNA digester Mix和Hifair® Ⅲ SuperMix处理，按说明书程序逆转录后进行qPCR检测。
5.RNA大投入12μL，有利于低浓度模板检测
1）残留基因组DNA去除 |
|
| 2）逆转录反应 |
|
组分 | 使用量 |
| 组分 | 使用量 |
RNase free ddH2O | To 15 μL |
| 第1步的反应液 | 15 μL |
5×gDNA digester Mix | 3 μL |
| 4×Hifair® Ⅲ SuperMix plus | 5 μL |
模板RNA | Max:12 uL |
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客户使用情况
产品上市以来，短短一个月内已得到广大用户认可— 使用客户数量300+
主要有：中国科学院上海生命科学研究院，北京大学，中国农业大学，清华大学，华东理工大学，上海交通大学，复旦大学，华中农业大学，浙江大学，中国药科大学，武汉大学，中山大学，东南大学，南京林业大学，华南农业大学，南京农业大学，南方医科大学，中国农业科学院中国水稻研究所，中国科学院水生生物研究所，暨南大学，中科院健康科学研究所，中国科学院动物研究所，华东师范大学，同济大学，中国科学院微生物研究所，第二军医大学，上海市东方医院，上海植物逆境生物学研究中心，中国农业科学院上海兽医研究所，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所，浙江大学医学院附属第二医院，中国科学院植物研究所，中国科学院南京土壤研究所，中国科学院遗传与发育生物学研究所，中国科学院上海有机化学研究所，中国科学院生物物理研究所，中国科学院南海海洋研究所，浙江省农业科学院等单位的课题组。
常见问答
Q：Hifair® Ⅲ SuperMix后续只能用于qPCR实验吗？
A：推荐用于qPCR实验，常规长度基因克隆实验也可以用。
Q：为什么说Hifair® Ⅲ SuperMix操作误差更小，重复性更好？
A：Hifair® Ⅲ SuperMix只有3个组分，且每个组分的添加体积均超过1μL，因此移液误差更小，重复性更好。
Q：Hifair® Ⅲ SuperMix逆转录反应的温度应设置为多少？
A：常规模板55℃即可，如果是具有复杂二级结构的模板或高GC含量的模板，可将温度适当提高至65℃，有利于提高逆转录效率。
Q：Hifair® Ⅲ SuperMix操作时可以不进行gDNA去除这一步吗？
A：可以省略。
Q：为什么Hifair® Ⅲ SuperMix更有利于低浓度模板检测？
A：一是该产品增强了与模板的亲和力，二是由于组分的设置，使得RNA大投入量可以达到12μL，对于低浓度模板可通过增大投入体积来增大模板投入量。
YEASEN逆转录产品部分已发表文献
1. Wang J, Ge P, Qiang L, et al. The mycobacterial phosphatase PtpA regulates the expression of host genes and promotes cell proliferation[J]. Nature communications, 2017, 8(1): 244. [ IF 12.353]
2. Nie, W., et al., Three-dimensional porous scaffold by self-assembly of reduced graphene oxide and nano
hydroxyapatite composites for bone tissue engineering[J]. Carbon, 2017.116, 325-337. [ IF7.082]
3. Li A, Liu Q, Li Q, et al. Berberine reduces pyruvate-driven hepatic glucose production by limiting mitochondrial import of pyruvate through mitochondrial pyruvate carrier 1[J]. EBioMedicine, 2018, 34: 243-255.[ IF6.68]
4. Zhu Y, Song D, Xu P, et al. A HD‐ZIP III gene, PtrHB4, is required for interfascicular cambium development in Populus[J]. Plant biotechnology journal, 2018, 16(3): 808-817. [ IF 6.305]
5. Yu S L, Wu J C, Liu P F, et al. Up-regulation of RNF187 induces hepatocellular carcinoma cell epithelial to mesenchymal transitions[J]. Oncotarget, 2017, 8(60): 101876. [ IF 6.18]
6. Yu X, Hu L, Li S, et al. Long non-coding RNA Taurine upregulated gene 1 promotes osteosarcoma cell metastasis by mediating HIF-1α via miR-143-5p[J]. Cell death & disease, 2019, 10(4): 280.[ IF 5.959]
7. He L, Fan X, Li Y, et al. Overexpression of zinc finger protein 384 (ZNF 384), a poor prognostic predictor,
promotes cell growth by upregulating the expression of Cyclin D1 in Hepatocellular carcinoma[J]. Cell death &
disease, 2019, 10(6): 444.[ IF 5.959]
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产品名称 | 产品编号 | 规格 | 原价（元） |
Hifair® Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus) | 11141ES60 | 100 T | 1383.00 |
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