Seahorse XF 细胞线粒体压力测试
Seahorse XF 细胞线粒体压力测试全面了解线粒体功能
1、实验背景
安捷伦 SeahorseXF 细胞线粒体压力测试通过在 Seahorse XFe 和 XF 细胞外流量分析仪上直接测量细胞的氧消耗速率（OCR）来表征线粒体功能的关键参数。它是基于培养板的活细胞实验，能够实时监测 OCR。
实验使用 XF 传感器探针板内置的加药孔在实验过中将呼吸作用的调节剂加入细胞孔中，从而得到反映线粒体功能的关键参数。实验试剂盒里的调节剂为寡霉素（Oligomycin），羰基氰-4（三氟甲氧基）苯腙（Carbonyl cyanide-4 (trifluoromethoxy)Phenylhydrazone，FCCP），鱼藤酮（Rotenone）。
Seahorse XF 细胞线粒体压力测试词汇表：
基础呼吸（Basal respiration）：用来满足细胞ATP需求和线粒体质子渗漏的氧消耗。表示细胞在基础条件下的能量需求。
ATP产生（ATP Production）：加入ATP合酶抑制剂寡霉素后减少的氧气消耗速率，代表基础呼吸中被用来驱动ATP产生的部分。表示用来满足细胞能量需求的线粒体ATP产生。
H+（质子）渗漏（H+ (Proton) leak）：与 ATP产生不偶联的基础呼吸的剩余部分。质子渗漏可以被看作是线粒体损伤的标志，也可被看作是一种调节线粒体ATP产生的机制。
最大呼吸（Maximal respiration）：加入解偶联剂FCCP之后获得的最大氧气消耗速率。FCCP通过刺激呼吸链以最大能力运转模拟生理的“能量需求”，导致底物（糖，脂肪和氨基酸）的快速氧化以应对这一代谢挑战。显示细胞能够达到的最大呼吸速率。
备用呼吸能力（Spare respiratory capacity）：这个测量指标表示细胞应对能量需求的能力以及细胞呼吸与其理论最大值的差距。细胞应对能量需求的能力可作为细胞适应性或灵活性的一个指标。
非线粒体呼吸（Nonmitochondrial respiration）：加入鱼藤酮后，由于一部分细胞中的酶继续消耗氧而存留的氧消耗。这对于线粒体呼吸的准确测量很重要。
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