技术文章

月旭层析填料选择指南

月旭科技(上海)股份有限公司 >> 进入商铺

2022/1/5 12:55:19

微信截图_20220105124615.png

《疫苗纯化 -- 病毒类疫苗纯化》


凝胶过滤介质Tanrose 4FF或Tanrose 6FF是经典的病毒类疫苗纯化方法,可以去除培养基中的杂蛋白、处理量大、快速的特点。柱高一般40-70cm,上样量一般为10-15%。目前使用此方法生产的疫苗品种有:乙肝、狂犬、出血热、流感等。


微信截图_20220105124634.png

微信截图_20220105124644.png

《纯化 -- 重组蛋白》


His标签重组蛋白可以很方便用镍 IDA琼脂糖凝胶FF(Ni Tanrose 6FF IDA)或镍NTA琼脂糖凝胶FF(Ni Tanrose 6FF NTA)分离,填料已经螯合好了镍离子,使用非常方便,有更高的吸附载量,特异性更强,可以选择多种洗脱方式,是纯化这类融合蛋白的最佳工具。

GST融合蛋白可以用GST琼脂糖凝胶FF(GST Tanrose 4FF)分离,然后再用肠激酶或凝血酶等酶解就得到表达的产物。凝血酶可以用肝素琼脂糖凝胶FF(Heparin Tanrose 6FF)或苯甲脒琼脂糖凝胶FF(Benzamidine Tanrose 4FF)分离。


微信截图_20220105124800.png

微信截图_20220105124811.png

《纯化 -- 血浆蛋白》


阴离子交换在血浆蛋白的纯化中应用非常广泛,结合低温乙醇法在丙种球蛋白纯化后期用DEAE-琼脂糖凝胶FF(DEAE Tanrose  6FF)吸附二聚体等杂质从而达到提高产品纯度的目的,同样也可以在白蛋白纯化过程中使用阴离子交换吸附PKA、微量的IgG以及聚体,在凝血VIII因子纯化过程中使用大孔径的Q琼脂糖凝胶(Solid Q)可以增加载量和回收率。


微信截图_20220105124854.png

微信截图_20220105124906.png

《纯化 -- 核酸、病毒》


核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子,和质粒DNA一样,可用分离大分子的Tanrose 4FF 凝胶过滤介质去除杂蛋白,再配合离子交换 Q琼脂糖凝胶(Q Tanrose 6FF)分离核酸。也可以用DEAE琼脂糖凝胶FF(DEAE Tanrose  6FF)或Q琼脂糖凝胶FF(Q Tanrose 6FF)富集和分离后再上琼脂糖凝胶6B或6FF得到纯的病毒。


微信截图_20220105124946.png

微信截图_20220105124957.png

《去除 -- 蛋白中的核酸》


核酸带阴电荷,在初步纯化时利用阳离子交换介质如 SP 或CM Tanrose FF 结合目标蛋白,可除去大量核酸。核酸在高盐下会和蛋白解离,疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白,在纯化蛋白的同时去除核酸。利用核酸酶将核酸切成小片断,用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。


微信截图_20220105125150.png

微信截图_20220105125159.png

《纯化 -- 中草药有效成分》


中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用,有效成分多较为亲水,包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析,更容易分离到单一活性成分。葡聚糖凝胶LH-20(Tandex LH-20)同时具备吸附性层析和分子筛功能,例如:用甲醇分离黄酮甙,三糖甙先被洗下来,二糖甙其次,单糖甙随后,最后是甙元。葡聚糖凝胶LH-20(Tandex LH-20)可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂,广泛用于各种天然产物的分离,包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。

生物碱在酸性缓冲液中带正电,成为盐,SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反,黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中,在Q阴离子交换柱上分离效果良好。

《样品净化 -- 脱盐、小分子去除》

使用凝胶过滤介质Tandex G10、G15、G25等去除小分子,效率高,处理量可达床体积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液,就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子,简单直接。由于只是去除小分子,柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分种至半小时完成。月旭Tandex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计。

病毒、DNA疫苗或质粒可以用琼脂糖凝胶6B除盐或交换缓冲液,蛋白、抗体等可以用葡聚糖凝胶G25快速去盐和交换缓冲液。


微信截图_20220105125233.png


相关产品

猜你喜欢

当前客户在线交流已关闭
请电话联系他 :
1 174