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高纯度RNase A纯化工艺方案分享

月旭科技(上海)股份有限公司 >> 进入商铺

2023/11/27 10:20:40

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核糖核酸酶A

核糖核酸酶A(Ribonuclease A,缩写RNase A),是一种含4个二硫键的单链多肽,分子量约为13.7kDa(氨基酸序列)。RNase A是一种核糖核酸内切酶(endoribonuclease)。


核糖核酸酶层析纯化思路

提取及粗纯方案

我们基本采用牛胰腺硫酸铵盐析粗提物(由McDonald根据Kunitz氏纯化方法修改,“Methods in Enzymology”,Vol.ⅡP429,1955.)。


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结论:

通过对牛胰腺盐析粗提物处理,上样CM Tanrose 6FF进行RNase A的分离纯化,其纯度得到了很大的提升,去除了较多的杂蛋白,经后续一定的处理后,跑SDS-PAGE胶,凝胶成像仪分析显示单一条带,符合纯化要求。

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