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ELISA实验操作方法

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2024/8/8 13:59:16
  ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,酶联免疫吸附试验)是一种常用的实验技术,用于检测和定量分析样品中特定抗原或抗体的存在。ELISA是基于免疫学原理的一种高灵敏度和高特异性的实验方法。下面让我们一起来看看ELISA实验操作方法吧
 
  ELISA实验通常包括以下步骤:
 
  1. 涂覆:将待检测的抗原或抗体溶液加入到微孔板(通常是96孔板)中,并在孔板表面上形成一层固定的抗原或抗体。这个过程被称为涂覆。
 
  2. 阻断:为了防止非特异性结合,需要在涂覆后加入一种阻断剂,例如牛血清蛋白(BSA)或牛奶粉,以覆盖孔板上未被固定的表面。阻断剂可以减少非特异性结合和降低背景信号。
 
  3. 样品加入:将待测样品加入到微孔板中,样品中的目标抗原或抗体与固定在孔板上的抗体或抗原相互作用。
 
  4. 洗涤:通过反复洗涤孔板,去除未结合的物质,以减少背景信号。
 
  5. 探针加入:加入与待测物体特异性结合的酶标记二抗(例如辣根过氧化物酶-HRP)或酶标记抗原,使其与样品中的目标物体结合。
 
  6. 洗涤:再次洗涤孔板,去除未结合的酶标记物。
 
  7. 底物加入:加入一种底物,其与酶标记物相互作用,产生可测量的信号。常用的底物是一种可被酶催化产生颜色或荧光的物质。
 
  8. 反应停止:通过加入一种停止剂,停止底物的反应,阻止信号进一步增加。
 
  9. 信号测量:使用光谱仪或荧光测量仪测量底物反应产生的信号,根据信号的强度来确定样品中目标物体的浓度。
 
  更多有关ELISA实验操作方法,请联系天津益元利康生物科技有限公司!

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