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2024/11/26 13:06:04翌圣Hieff Clone®系列克隆试剂盒,历经数次迭代与优化,如今已囊括了从基础克隆到高通量、高效能的一站式分子克隆系列解决方案,既含有用于载体构建、基因突变等的通用型一步法快速克隆试剂盒,又含有用于测序、储存DNA片段的通用型TOPO克隆试剂盒(兼容TA和平末端)。
翌圣分子克隆试剂盒操作步骤
翌圣Hieff Clone®系列克隆试剂盒自2017年诞生至今,客户好评不断,每年均有客户使用克隆试剂盒产品发表高分文章,包括Nature、Cell等多个顶级期刊,获得科研大牛们认可!据统计,截至2024年10月31日,翌圣克隆试剂产品多年来累计参与发表文章173篇文章,累计影响因子达1388.86,包括一步法快速克隆试剂盒和TOPO克隆试剂盒。
最新通用型产品推荐
产品分类 | 产品定位 | 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
快速克隆试剂盒 | 1-7片段一步法定向连接,最快5分钟完成重组反应 | Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit | 10923ES20/50 | 20 T/50 T |
TOPO克隆试剂盒 | 兼容TA/平末端克隆 | Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit | 10906ES08/20 | 5 T/20 T |
小翌强烈推荐翌圣通用型多片段快速克隆试剂盒(Cat#10923ES),满足6 μL小体系、10 ng低浓度载体与片段的连接,菌落数多,克隆阳性率高,客户反馈效果好!(右戳申请试用☞ 试用装申请)
一步法克隆与传统酶切克隆方法的比较
方法 | 插入片段制备 | 酶切位点限制 | 通用性 | 连接时间 | 阳性率 |
一步法快速重组克隆技术 | 1步纯化 | 无 | ★★★★★ | 最快5 min | 高达95% |
酶切连接克隆技术 | 2步纯化 | 有 | ★★ | 过夜 | 不同基因差别大 |
定向:可满足1-7个DNA片段的定向无缝拼接
简便:片段无需酶切,多片段连接一管内即可完成
快速:最快5分钟即可完成连接反应
高效:克隆生长数多,克隆阳性率可达95%以上
广泛:适用于任何载体,兼顾粘性和平末端;可用于多片段、点突变等的克隆
超长:载体片段连接长度可达25 kb以上
性能展示
单片段6 μL小体系高效重组
图1. 在6 μL小体系非复苏感受态下,连接10 ng低投入量单片段。结果显示,10923ES性能好于竞品,连接效率高,菌落数多,阳性率达100%。A-B:重组转化平板。载体(10 kb)和插入片段(1 kb)摩尔比为1:2。C:插入片段PCR鉴定电泳图,M:Yeasen 10505ES。
低浓度多片段高效重组
图2. 分别连接低浓度的五片段和六片段。结果显示,10923ES在低浓度下连接性能稳定,菌落数多,阳性率100%。A-B:重组转化平板。载体(11.6 kb)和插入片段(5片段共5.6 kb、六片段共7.6 kb)摩尔比为1:2。C-D:插入片段PCR鉴定电泳图,M:Yeasen 10505ES,菌P长度2.6 kb。
客户体验反馈专区
01 高效、快速小体系单片段连接
图3. Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit 10 μL小体系单片段连接和点突变克隆,阳性率100%。A&C:重组转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图,泳道1-5分别为菌落1,菌落2,阴性对照,阳性对照(基因组作为模版),阳性对照(PCR纯化片段作为模版)。D:插入片段PCR鉴定电泳图。
02 高效、快速多片段连接
图4. Hieff Clone® Universal II One Step Cloning Kit多片段连接,阳性率100%。A&C:重组转化平板。B:插入片段测序鉴定图。D:插入片段PCR鉴定电泳图。
通用型TOPO克隆试剂盒
小翌强烈推荐翌圣零背景通用型TOPO克隆试剂盒(Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit,Cat#10906ES),利用新一代拓扑异构酶(Topoisomerase)的原理,搭配高效的平末端化因子,仅需5 min快速克隆连接平末端产物和粘性末端产物,操作简单,连接效率高,克隆阳性率接近100%,客户反馈效果好!(右戳申请试用☞ 试用装申请)
TOPO克隆与传统TA克隆方法的比较
方法 | 反应时间 | 反应温度 | 体系组成 | 克隆阳性率 | PCR产物 |
TOPO克隆技术 | 5 min | 室温 | 载体+插入片段 | ★★★★★ | 载体无需加“A” |
传统TA克隆技术 | 过夜 | 16℃ | 载体+插入片段+T4连接酶 | ★★ | 需要加“A” |
优势性能
快速:仅需5分钟即可完成连接反应。
高效:无自连现象,阳性克隆率接近100%,无需设置蓝白斑筛选。
连接片段:可连接150 bp-5 kb目的产物。
简便:只需加入纯化后目的片段即可。
兼容性广:添加平末端因子,兼容TA克隆与平末端克隆。
性能展示
平末端/粘性末端片段高效连接
图5. 相同体系下,分别投入200 bp粘性末端片段、1 kb粘性末端片段、2 kb平末端片段、4 kb平末端片段进行连接,结果显示,Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit试剂盒可以兼容粘性末端和平末端片段TOPO克隆。
客户体验反馈专区
平末端克隆高效连接
图6. 3000 bp(120 ng)平末端片段连接,Hieff Clone® Universal Zero TOPO TA/Blunt Cloning Kit连接效率高,菌落数多,阳性率100%。A:连接转化平板。B:插入片段PCR鉴定电泳图。
粘性末端片段高效连接
图7. 100 bp-500 bp(50 ng)粘性末端片段连接,与进口产品相比,10906ES连接效率高,菌落数多,4组样品各挑10个单克隆,所有有效单克隆全为成功插入,阳性率100%。A&B:连接转化平板。C:插入片段测序鉴定图。
Hieff Clone®系列克隆产品近年来助力高分文章成果
2017年
研究团队:中国科学院分子细胞科学创新中心陈玲玲课题组
发表期刊:Cell
影响因子:30.410
翌圣产品:Hieff Clone® One Step Cloning Kit(该货号已下架)
2018年
研究团队:浙江大学生物医学工程与仪器科学学院
发表期刊:Molecular Cell
影响因子:14.548
翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)
2019年
研究团队:中国科学院分子细胞科学创新中心
发表期刊:Cell
影响因子:36.216
翌圣产品:Hieff Clone® One Step Cloning Kit(该货号已下架)
2020年
研究团队:北京工商大学植物资源研究与开发北京市重点实验室
发表期刊:Nature Communications
影响因子:12.121
翌圣产品:Hieff Clone® Plus Multi One Step Cloning Kit(Cat#10912ES)
2021年
研究团队:中国科学院分子细胞科学创新中心
发表期刊:Molecular Cell
影响因子:17.970
翌圣产品:Hieff Clone® One Step Cloning Kit(该货号已下架)
2022年
研究团队:华东理工大学药学院
发表期刊:Cell Metabolism
影响因子:31.373
翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)
2023年
研究团队:中国科学院分子细胞科学创新中心
发表期刊:Nature
影响因子:69.504
翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)
2024年
研究团队:武汉大学生命科学学院
发表期刊:Nature Microbiology
影响因子:30.964
翌圣产品:Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit(Cat#10911ES)
相关产品
产品系列 | 产品定位 | 名称 | 货号 | 规格 |
一步法快速克隆试剂盒 | 单片段一步克隆,已发文章累计IF达到1000+ | Hieff Clone® Plus One Step Cloning Kit一步法快速克隆试剂盒 | 10911ES20/50 | 20 T/50 T |
1-6片段一步克隆,最快5分钟完成重组反应 | Hieff Clone® Universal One Step Cloning Kit通用型一步法快速克隆试剂盒 | 10922ES20/50 | 20 T/50 T | |
TOPO克隆试剂盒 | 替代TA连接克隆 | Hieff Clone® Zero TOPO-TA Cloning Kit | 10907ES20 | 20 T |
替代TA连接克隆(不含MCS多克隆位点) | Hieff Clone® Zero TOPO-TA Simple Cloning Kit, MCS-Depleted | 10908ES20 | 20 T | |
替代平末端连接克隆 | Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Cloning Kit | 10909ES20 | 20 T | |
替代平末端连接克隆(不含MCS多克隆位点) | Hieff Clone® Zero TOPO-Blunt Simple Cloning Kit, MCS-Depleted | 10910ES20 | 20 T | |
感受态细胞 | 5 min快速完成感受态转化 | DH5α Fast Chemically Competent Cell F DH5α化学感受态 | 11803ES80 | 10×100 μL |
常规感受态细胞 | 10 Chemically Competent Cell 10化学感受态细胞 | 11801ES80 | 10×100 μL | |
常规感受态细胞 | DH5α Chemically Competent Cell DH5α 化学感受态细胞 | 11802ES80 | 10×100 μL | |
常规感受态细胞 | BL21(DE3) Chemically Competent Cell BL21(DE3)化学感受态细胞 | 11804ES80 | 10×100 μL | |
高保真PCR | 5s/kb,保真保快 | 2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) | 10164ES03/08 | 1 mL/5×1 mL |
快速PCR | 快速PCR升级,可菌P且适用复杂模板扩增 | 2×Hieff® Ultra-Rapid II HotStart PCR Master Mix | 10167ES03/08 | 1 mL/5×1 mL |