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兔白介素17 ELISA试剂盒
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兔白介素17 ELISA试剂盒
试剂盒组成
1. 酶标板: 96T/8孔
2. 标准品液:: 0 ppb、0.1 ppb、0.4 ppb、1.6 ppb、6.4 ppb、25.6 ppb(1mL/瓶)
3. 抗体工作液 1瓶(7 mL)4. 酶标记物: 1瓶(12 mL)5. 底物缓冲液: 1瓶(7 mL)6. 底物液: 1瓶(7 mL)7. 终止液: 1瓶(7 mL)8. 20倍浓缩洗涤液: 1瓶(50 mL) 加蒸馏水稀释到1000 mL
9. 样品稀释液: 1瓶(12 mL) 用于稀释尿样
样品处理
尿样:(稀释倍数为2)
先加入25μL样品稀释液,再加入25μL尿样到微孔板中,混合均匀。浑浊尿样以4000 rpm离心5 min,取上清(清亮部分)。
猪肝、猪肉等组织
前处理配制的溶液
配液1:0.5M盐酸溶液
量取41.5ml浓盐酸加入去离子水定容到1000 ml
配液2:8%氯化钠溶液
称取80.0g氯化钠,加1000ml去离子水溶解混匀
配液3:提取液
配液1:配液2=1:4比例混合
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ELISA试剂盒操作步骤:
1. 加标准品:在酶标包被板上设标准品孔,ELISA试剂盒 依次加入不同浓度的标准品50ul(建议每个浓度做2个平行孔)人ELISA试剂盒。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。大鼠ELISA试剂盒在酶标包被板上待测样品孔中先加样品40μl,然后再加样品亲和素10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀小鼠ELISA试剂盒。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟ELISA试剂盒。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,大鼠ELISA试剂盒每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干小鼠ELISA试剂盒。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外ELISA试剂盒。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟人ELISA试剂盒.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。