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BC0595-100T/96S 游离脂肪酸（FFA）含量检测试剂盒
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- BC0595-100T/96S
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北京索莱宝科技有限公司
（Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd. ）是一家从事生物学试剂及试剂盒的高科技生物企业。
总部位于北京，并在设有经销或代理机构。产品因可靠而稳定的质量和较为完善的售后服务确立了“Solarbio”良好的品牌形象。公司秉承“以客户为中心、以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨”的发展理念，拥有专业的研发和质量检测团队以及的仓储和物流系统。“Solarbio”已经得到科研工作者的认可，成为广大经销商推崇的。
公司拥有一批专业的研发人员，我们专注于生物产品的不断完善和创新。产品覆盖面广，品质可靠。先后开发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的多种试剂及试剂盒。同时，索莱宝公司提供各种常规生化试剂，库存常备产品多达10000多种，可随时为广大科研工作者提供各类专业试剂。在质量方面，索莱宝谨记公司信念：质量高于一切。所有研发的产品都设有严谨的生产流程，科学的质量检测方法和成熟的质量检测程序，我们恪守对每一位用户的承诺：用专业的态度做专业的品牌。同时，公司组建了一支专业的技术服务队伍，能够为科研工作者提供专业的技术服务。每一位购买索莱宝产品的用户都能够得到专业的咨询和完善的售后服务。
索莱宝公司坚持与接轨，注重和企业的合作与交流，并提供产品代理、市场咨询等多项服务。公司将一如既往与世界更多合作，不断为广大生物科研工作者提供更优质的产品和服务。公司理念：“为科研服务，为生命尽责”。一个人能够走多远，取决于与谁同行。索莱宝公司期待与各同行精诚合作。
索莱宝诚招生物试剂研发人员，期待与广大同行精诚合作，为广大科研工作者提供优质的产品，高效的物流以及专业的售后服务。索莱宝感谢所有朋友的支持与帮助，您的支持是我们前进的动力和保障。让我们携手同行，共同创造美好的明天。
详细信息
游离脂肪酸（FFA）含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0595
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 提取液 | 液体110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂一 | 自备试剂 | - |
| 试剂二A | 液体20mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂二* | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 试剂三 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 标准品 | 粉剂×1支 | 常温保存 |
溶液的配制：
试剂一：实验前，取一个玻璃瓶，按照正 庚烷：无水甲醇：氯仿=24:1:25的比例配制（自备），盖紧后混匀，大概需要50mL，2-8℃保存。使用后及时封口；
试剂二：将试剂二*倒入试剂二A中40℃加热震荡溶解20min，此溶液为饱和溶液，若还有粉剂未溶解，取上清使用即可，2-8℃可以保存3个月；
试剂三：临用前取1瓶加入13 mL无水乙醇充分溶解，未用完的试剂2-8℃可以保存2周；
标准品：临用前把试剂转移到10 mL玻璃瓶中，加入7.8 mL氯仿充分溶解，即为5μmol/mL的棕榈酸标准溶液，未用完的试剂2-8℃可以保存4周。
产品说明：
FFA既是脂肪水解的产物，又是脂肪合成的底物。血清中FFA的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关。
FFA与铜离子结合形成脂肪酸铜盐，并溶于氯仿；利用铜试剂法测定铜离子含量，即可推算出游离脂肪酸含量。
技术指标：
检出限：0.0390 μmol/mL
线性范围：0.05-2 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液枪、漩涡混匀器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、一个50mL玻璃瓶、一个10mL玻璃瓶、正 庚烷、无水甲醇、氯仿（*）、冰、无水乙醇和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项：
1. 试剂三配制应尽量晚配，可在操作到加入试剂二时，再配制试剂三。
2. 必须保证每管的震荡频率及时间一致。
3. 尽量在30min内完成测量。
4. 上层溶液不可以直接加入到96孔板内，并且测完后要密封好再丢弃。
5. 因所用试剂多数为有机溶剂，同一支吸头多次吸取会造成体积不准确，建议更换吸头。
实验实例：
取小鼠血清进行样本处理，按照测定步骤操作，使用96孔板测得A对照管=0.098、A测定管=0.308、ΔA测定=A测定管-A对照管=0.308-0.098=0.21，带入标准曲线y =0.6679x+0.019，计算x=0.286，按血清含量计算：
FFA含量（μmol/L）=1000x=1000×0.286=286 μmol/L。
相关发表文献：
Shanming Ruan,Zhiqian Zhang, Xinxin Tian,et al. Compound Fuling Granule Suppresses Ovarian Cancer Development and Progression by disrupting mitochondrial function, galactose and fatty acid metabolism. Journal of Cancer. September 2018;(IF3.182)
Tunyu Jian,Yuexian Wu,Xiaoqin Ding,et al. A novel sesquiterpene glycoside from Loquat leaf alleviates oleic acid-induced steatosis and oxidative stress in HepG2 cells. Biomedicine & Pharmacotherapy. January 2018;(IF3.743)
Rui Wang,Junhua Yuan,Caishun Zhang,et al. Neuropeptide Y-Positive Neurons in the Dorsomedial Hypothalamus Are Involved in the Anorexic Effect of Angptl9. Frontiers in Immunology. December 2018;(IF3.72)
Yao L, Chen S, Li W. Fatostatin inhibits the development of endometrial carcinoma in endometrial carcinoma cells and a xenograft model by targeting lipid metabolism[J]. Archives of Biochemistry and Biophysics, 2020: 108327.
参考文献：
Laurell S, Tibbling G. Colorimetric micro-determination of free fatty acids in plasma[J]. Clinica chimica acta, 1967, 16(1): 57-62.
Itaya K. A more sensitive and stable colorimetric determination of free fatty acids in blood[J]. Journal of lipid Research, 1977, 18(5): 663-665.
Duncombe W G. The colorimetric micro-determination of non-esterified fatty acids in plasma[J]. Clinica chimica acta, 1964, 9: 122-125.
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