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40770ES60 一氧化氮检测探针
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- 40770ES60
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企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
DAF-2 DA (4,5-Diaminofluorescein diacetate) 一氧化氮检测探针 | 40770ES60 | 100 μg | 699.00 |
产品描述
DAF-2 DA即4,5-Diaminofluorescein diacetate 4,5-二氨基荧光素衍生物，是一种用于检测一氧化氮（NO）的荧光探针。DAF-2 DA具有细胞通透性，进入细胞后被细胞内的的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的DAF-2。DAF-2本身具有很弱的荧光，当氧气存在时，DAF-2与NO反应生成强荧光的三唑荧光素（DAF-2T），激发波长为491 nm，发射波长为513 nm。可以通过荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、酶标仪等仪器检测探针的荧光强度。DAF-2 DA是一种较灵敏的荧光探针，中性pH下NO的检测下限可达到2-5 nM。
将该产品用DMSO配置成液体，100 μg的DAF-2 DA粉末溶于200 μL的DMSO中，浓度是：1 mM。
产品性质
中文别名（Chinese Synonym） | 4,5-二氨基荧光素衍生物 |
产品名称（English Synonym） | DAF-2 DA (4,5-Diaminofluorescein diacetate) |
CAS号（CAS NO.） | 205391-02-2 |
分子式（Formula） | C24H18N2O7 |
分子量（Molecular Weight） | 446.41 |
激发和发射（Ex和Em） | Ex = 491nm和Em =513 nm |
溶解性（Solubility） | 易溶于DMSO (≥5 mM) |
结构式（Structure） |
|
运输和保存方法
冰袋运输。 -20 ℃避光保存，避免反复冻融，有效期一年。
注意事项
1）BSA和酚红(phenol red)对本荧光探针的检测有干扰，需避免。
2）DAF-2 DA在低温环境中，可能会凝固，使用前可以放在2--25 ℃水浴锅中加热一段时间，使其全部溶解后再使用。
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
4）粉末溶解前请先短暂离心，以保证产品全在管底。
5）本产品仅用于科研用途，禁止用于人身上。
使用说明
1. 装载探针
注意：
a. 拿到产品溶液后，建议先分装，避光保存在-20 ℃冰箱中。稀释后的工作液要现配现用。
b. 对于刺激时间较短（通常为2 h以内）的细胞，先装载探针，后用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞。对于细胞刺激时间较长（通常为6 h以上）的细胞，先用适当的阳性对照及自己感兴趣的药物刺激细胞，后装载探针。
c. DAF-2 DA探针的推荐使用浓度为1-10 µM，初次使用需根据自身实验体系来进行加载浓度，孵育时间和温度的优化。原则上来说，以低浓度探针检测且产生足量信噪比的荧光信号为宜。另缩短孵育时间可减少亚细胞区室化现象。
d. 以下步骤使用的工作浓度（5 µM）和孵育时间（37 ℃，20 min）仅做参考，可根据实际情况来调整。比如，对于某些细胞，如果发现未被刺激的阴性对照细胞荧光也比较强，可降低DAF-2 DA的加载浓度至1-2.5 µM。相反，如果发现用感兴趣的药物刺激后荧光较弱，可升高DAF-2 DA的加载浓度为10 µM，以提高检测的灵敏度。另外，探针装载的时间也可以根据情况在15-60 min内适当进行调整，孵育温度在4 ℃-37 ℃内调整。
1.1原位装载探针：本方法仅适用于贴壁细胞
按照1:200的比例，用适当的缓冲溶液（PBS、HBSS、DPBS、无血清的培养基）稀释DAF-2 DA（1 mM）母液，即终浓度为5 µM的工作液。去除细胞培养液，加入适当体积稀释好的DAF-2 DA。加入的体积以能充分盖住细胞为宜，通常情况下六孔板内单孔需要约1 mL的DAF-2 DA工作液。37 ℃孵育20 min。然后用PBS（pH 7.4）洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DAF-2 DA。
1.2收集细胞后装载探针：本方法适用于贴壁细胞和悬浮细胞
按照1:200比例，用适当的缓冲溶液（PBS、HBSS、DPBS、无血清的培养基）稀释DAF-2 DA（5 mM），即终浓度为5 µM的工作液。细胞收集后，用稀释好的DAF-2 DA重悬细胞，细胞浓度为1×106-2×107/mL，37 ℃孵育20 min。上述操作可以在离心管内进行。每隔3-5 min颠倒混匀一下，使探针和细胞充分接触。然后用PBS（pH 7.4）洗涤细胞三次，以充分去除未进入细胞内的DAF-2 DA。直接用适当的阳性对照或自己感兴趣的药物刺激细胞，或把细胞等分成若干份后再刺激细胞。
2. 检测
2.1 对于原位装载探针的样品可以用激光共聚焦显微镜或普通的荧光显微镜直接观察，或收集细胞后用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测。
2.2 对于收集细胞后装载探针的样品可以用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测，也可用激光共聚焦显微镜直接观察。
3. 参数设置
在激发和发射波长分别为491 nm和513 nm处，实时、逐时间点或单时间点检测刺激前后荧光的强弱。根据荧光强弱的变换，来分析判断细胞中一氧化氮（NO）的含量高低。
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