- 面议
起订量：
INTERFERin® siRNA/miRNA体外转染试剂
- 型号
该企业相似产品
企业简介
翌圣生物科技（上海）股份有限公司【Yeasen Biotechnology (Shanghai) Co., Ltd.】是一家以蛋白质改造和酶进化技术为驱动，聚焦生命科学产业链上游核心原料，从事分子、蛋白和细胞三大品类生物试剂的研发、生产与销售的高新技术企业，通过打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，成为国内少数同时覆盖三大品类生物试剂、兼备核心技术自主研发能力和规模化生产能力的高新技术企业，产品广泛应用于生命科学研究领域、诊断与检测领域和生物医药领域。
主营业务
公司凭借在蛋白质改造和酶进化领域的技术优势和深耕生物试剂行业多年积累的丰富经验，构建了品质优良、类型齐全、种类丰富的产品管线。自公司成立以来，公司研发、生产和销售的生物试剂超过3000种，涵盖分子、蛋白、细胞三大品类的生物试剂，能够满足客户多种类型生物试剂的一体化采购需求。公司核心产品覆盖qPCR系列、NGS系列、逆转录系列、核酸提取与纯化系列、PCR系列、分子克隆系列、体外转录系列、抗体、蛋白纯化系列、蛋白分析系列、重组蛋白、细胞分析系列、细胞培养系列、细胞转染系列、报告基因检测系列等多个品类的生物试剂，广泛应用于生命科学研究、诊断检测和生物医药等领域。
发展历程
荣誉资质
翌圣生物通过申请商标和软件著作权的方式保障核心技术和市场竞争力，不断加强公司品牌建设。截至2022年3月31日，公司已经获得授权18项（其中发明14项、实用新型1项、外观设计3项）和45项与生物试剂相关的软件著作权，拥有经国家知识产权局商标局核准的注册商标权37项以及4项境外注册商标，是国家高新技术企业和上海市专精特新企业。
创新平台
经过多年的产品研发技术经验的沉淀以及持续的研发创新，翌圣生物积极开展“产学研”合作，与拥有生物催化与酶领域国家重点实验室的湖北大学、拥有教育部工业生物领域重点研究基地的江南大学展开合作，优化生物试剂关键原料的生产和表达工艺。翌圣生物以基因工程技术、生物信息技术、细胞生物学技术、免疫学技术、生化分析技术等生命科学领域的共性生物技术为基础，建立了六大核心技术平台——双向分子酶理性设计与定向进化平台、密度发酵与超洁净纯化平台、分子诊断试剂关键原料研发平台、高通量测序建库试剂创新研发平台、高性能单克隆抗体研发平台和mRNA医药应用研发平台，目前已经自主研发出20项核心技术，打通分子酶、蛋白、抗体、核酸、细胞的技术开发路径，覆盖技术研发、产品升级、规模生产和质量控制等生物试剂研发和生产的各关键环节。
工业化生产
翌圣生物拥有按照准GMP 标准建设运营的工业化生产基地，配有吨级发酵线、工业级 AKTA 纯化线和全自动包装线。同时，公司通过了ISO 13485:2016质量管理体系认证，从原料控制、生产管理、质检管控、仓储运输等对生产线进行360度管理监督，保证产品过程的可控制性及可追溯性，竭尽全力为您提供可靠的产品。
客户服务
翌圣生物凭借优质稳定的产品质量、高效及时的响应能力、快速稳定的交付能力和周到完备的售后服务获得了众多科研用户和工业用户的认可，为检测公司、治疗公司、工具类公司和科学研究实验室提供应用于科学研究、体外诊断、基因测序、生物医药等的生物试剂。与中国科学院、清华大学、北京大学、复旦大学、上海交通大学、浙江大学等顶尖科研院所和华大基因、恒瑞医药、药明康德、之江生物、圣湘生物、斯微生物、金斯瑞、思路迪等工业客户建立了稳定、紧密的合作关系，公司产品被多次使用在Nature、Science、Cell等国际顶级期刊论文发表中。
公司企业文化
帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐
◎ 成为生命科学工具领域全球Top⑩
◎ 具备驱动产业变革的技术创新能力
◎ 拥有一支持续学习型的翌圣铁军
翌圣生物始终秉承“帮助客户创造价值，让世界更健康更快乐”的使命，专注于技术创新和产品升级，不断拓展核心技术的应用领域，为客户提供更为的产品与服务，助力我国打造自主可控的生物试剂产业链。同时，翌圣生物将进一步推进国际化战略，继续布局和拓展海外市场，为全球生物试剂产业发展贡献力量。
详细信息
INTERFERin®in vitro siRNA/miRNA transfection reagent
INTERFERin® siRNA/miRNA体外转染试剂
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
INTERFERin®in vitro siRNA/miRNA transfection reagent INTERFERin® siRNA/miRNA体外转染试剂 | 409-01 | 0.1 mL | 655.00 |
409-10 | 1 mL | 3135.00 |
产品描述
INTERFERin®是Polyplus公司提供的一款非脂质体PEI阳离子、两性分子转染试剂，专门为将siRNA/miRNA转染到哺乳动物细胞中而开发。这种转染试剂包裹siRNA或miRNA形成阳离子复合物，该复合物与细胞表面带负电的蛋白聚糖相互作用吸附在细胞表面，通过内吞进入细胞，形成内含体。该转染试剂具有质子海绵的作用，能够吸收溶酶体中的H+，质子的不断流入，导致复合体肿胀破裂，从而使外源siRNA或miRNA释放到细胞质中。
INTERFERin®可在广泛的细胞系中，实现1 nM的siRNA超过90%的表达效率，避免了脱靶效应。适用于多种细胞转染，包括Hela、MCF-7、NIH-3T3等贴壁细胞；对于难以转染的悬浮细胞系，如K562或THP-1细胞，siRNA终浓度为5nM时，可达到80%的沉默效率；同时还可以转染原代人成纤维细胞和原代人肝细胞等，可达到80%的沉默效率。除此之外，也可根据转染的细胞系、核酸种类、转染时间等，登录Polyplus公司的网///址，搜索该产品引文数据库。Polyplus数据库提供了400多种的转染条件数据可供参考，Polyplus：w/w/w.polyplus transfection.c/o/m.
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。产品4 ºC保存，一年有效。不可冷冻！
注意事项
1）整个实验过程使用无RNA酶和无热原性的材料，如离心管、枪头、缓冲液。
2）转染前，确保siRNA/miRNA是经过PAGE纯化和脱盐处理过的，高纯度的siRNA或者miRNA有助于获得较高的转染效率。
3）INTERFERin®转染试剂应该在4 ºC保存，要注意避免多次反复长时间开盖，否则可能会导致转染试剂挥发，降低转染效率。
4）转染前一天，确保接种贴壁细胞密度在30%-50%，对于一些小细胞和生长缓慢的细胞，接种密度可适当扩大2倍。
5）转染前，确保siRNA/miRNA基因沉默表达不会影响细胞活力。
6）该产品只适合体外转染，不能用于体内转染。
操作流程
一．贴壁细胞转染（以24孔板和转染1 nM siRNA为例，其他培养板加样体积请参考表1）
为了提高转染效率，建议在转染前一天接种细胞，接种细胞密度建议30%-50%，建议初次使用时设置梯度进行优化//佳使用量。
【注】：由于靶基因、细胞类型、siRNA效价、靶mRNA的半衰期和靶蛋白的周转率等因素，均会影响siRNA的转染效率。建议选取siRNA浓度在1 nM到10 nM之间。转染试剂的体积应根据siRNA浓度和培养皿的大小进行调整，请参见下表1。
表1 siRNA终浓度为1 nM时，转染试剂、培养基的用量参考值
培养皿 | siRNA物质的量(pmoles) | 每孔siRNA的含量（ng） | INTERFERin®转染试剂体积（µL） | siRNA-INTERFERin®复合物的体积V1（µL） | *培养基的体积V2 | 终体积（V=V1+V2） |
96孔板 | 0.17 | 2.4 | 0.75 ± 0.5 | 50 | 125 µL | 175 µL |
24孔板 | 0.6 | 8.4 | 2 ± 1 | 100 | 500 µL | 600 µL |
12孔板 | 1.2 | 17 | 4 ± 2 | 200 | 1 mL | 1.2 mL |
6孔板 | 2.2 | 31 | 8 ± 4 | 200 | 2 mL | 2.2 mL |
25 cm2培养瓶 | 4.4 | 62 | 15 ± 5 | 400 | 4 mL | 4.4 mL |
75 cm2培养瓶 | 10.5 | 147 | 40 ± 10 | 500 | 10 mL | 10.5 mL |
表2 siRNA终浓度为10~50 nM时，转染试剂、培养基的用量参考值
培养皿 | INTERFERin®转染试剂体积（µL） | siRNA-INTERFERin®复合物的体积V1（µL） | *培养基的体积V2 | 终体积V（V=V1+V2） |
96孔板 | 1 ± 0.5 | 50 | 125 µL | 175 µL |
24孔板 | 3 ± 1 | 100 | 500 µL | 600 µL |
12孔板 | 6 ± 2 | 200 | 1 mL | 1.2 mL |
6孔板 | 12 ± 4 | 200 | 2 mL | 2.2 mL |
25cm2培养瓶 | 20 ± 5 | 400 | 4 mL | 4.4 mL |
二．悬浮细胞转染（以24孔板和转染5 nM siRNA为例，其他培养板加样体积请参考表4）
接种细胞
1.为了优化悬浮细胞转染条件，与贴壁细胞相比，需要降低悬浮细胞的培养基的体积。根据培养皿大小和完整培养基的体积，推荐的接种悬浮细胞的数量如下表3所示。
表3 转染当天，根据培养皿的大小，接种悬浮细胞数量参考值
培养皿 | 每孔接种细胞悬浮液体积（μL） | 转染当天接种细胞数 |
384孔板 | 25 | 5 ×103~1×104 |
96孔板 | 50 | 1×104~ ×104 |
24孔板 | 200 | 1×105 ~ 2×105 |
12孔板 | 500 | 2×105 ~ 4×105 |
6孔板 | 1000 | 5×105 ~ 2×106 |
25 cm2培养瓶 | 2000 | 2×106~ 5×106 |
2.按照以下体系配制siRNA-INTERFERin®复合物：
1）对于每孔细胞，使用100 μL无血清培养基（如OPTI-MEMⅠ培养基）稀释21 ng siRNA (1.5 pmols)，混匀。
2）向100 μL的siRNA中加入4 μL的转染试剂，立刻旋涡10秒，充分混匀。
3）在室温孵育15 min，使得形成siRNA-INTERFERin®复合物。
【注】：孵育时间不要超过30 min
4）在每孔200 μL细胞悬浮液中，加入100 μL的siRNA-INTERFERin®复合物，轻轻混匀。终体积为300 µL，siRNA终浓度为5 nM。
5）37 ℃，5% CO2培养箱培养4-6 h后，再加入700 µL*培养基，轻轻摇动培养板使其混匀。
6）继续放入培养箱中孵育，直至目的基因表达。建议一般mRNA表达水平通常在24-72 h，蛋白表达水平在48-96 h。
【注】：为了优化内源性基因沉默，建议选取siRNA浓度在5 nM到20 nM之间。转染试剂的体积应根据siRNA浓度和培养皿的大小进行调整，请参见下表4。
表4 siRNA浓度为5 nM时，在悬浮细胞中的参考值
培养皿 | 悬浮细胞的体积 | siRNA的浓度(pmoles) | 每孔siRNA的含量（ng） | 转染试剂体积（µL） | siRNA-INTERFERin®复合物的体积（µL） | 转染4-6h后另加入培养基的体积 |
384孔板 | 25 µL | 0.25 | 3.75 | 1 ± 0.5 | 25 | 0 µL |
96孔板 | 50 µL | 0.5 | 7.5 | 2 ± 1 | 50 | 100 µL |
24孔板 | 200 µL | 1.5 | 21 | 3 ± 2 | 100 | 700 µL |
12孔板 | 500 µL | 3.5 | 49 | 6 ± 4 | 200 | 1 mL |
6孔板 | 1 mL | 6 | 84 | 10 ± 8 | 200 | 2 mL |
25cm2培养瓶 | 2 mL | 12 | 168 | 15 ±10 | 400 | 4 mL |
表5 悬浮细胞中siRNA浓度、转染试剂的用量参考值
siRNA的终浓度/孔 | 培养皿 | INTERFERin®转染试剂的体积/孔 |
1 ~ 20 nM
| 386孔板 | 1 ± 0.5 µL |
96孔板 | 2 ± 1 µL | |
24孔板 | 3 ± 2 µL | |
6孔板 | 10 ± 8 µL | |
20 ~ 50 nM | 386孔板 | 1.5 ± 0.5 µL |
96孔板 | 3 ± 1 µL | |
24孔板 | 5 ± 2 µL | |
6孔板 | 15 ± 8 µL |
三．miRNA转染操作流程
该转染试剂也适合转染miRNA，转染贴壁细胞和悬浮细胞的具体操作请参考siRNA的操作流程。
相关产品
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格（元） |
jetPRIME®in vitro DNA & siRNA transfection reagent | 114-01 | 0.1 mL | 835.00 |
114-15 | 1.5 mL | 6395.00 | |
jetOPTIMUS® in vitro DNA transfection reagent | 117-01 | 0.1 mL | 835.00 |
117-15 | 1.5 mL | 6855.00 | |
jetPEI®DNA transfection, HTS application | 101-10N | 1 mL | 4565.00 |
INTERFERin®in vitro siRNA/miRNA transfection reagent | 409-01 | 0.1 mL | 655.00 |
409-10 | 1 mL | 3135.00 |
