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q711 实验qPCR.荧光定量
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实验qPCR.荧光定量
qPCR荧光定量是指在反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
qPCR荧光定量技术不仅实现了PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,qPCR荧光定量具有特异性更强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,已成为*的核酸分子定量的标准方法,目前在基因表达研究和临床疾病检测等领域已得到广泛应用(如转基因动植物检测、RNAi基因失活率检测、病原微生物或病毒含量检测、基因差异表达、基因分型)。
实验qPCR.荧光定量
实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)指的是在PCR进行的同时,对其过程进行监测的能力(即实时)。因此,数据可在PCR扩增过程中,而非PCR结束之后,进行收集。这为基于PCR的DNA和RNA定量方法带来了革命性的变革。在实时荧光定量PCR(qPCR)中,反应以循环中*检测到目标扩增的时间点为特征,而非在一定循环数后目标分子累计的扩增量。目标核酸的起始拷贝数越高,则会越快观察到荧光的显著增加。相反,终点法检测(也称“读板检测”)测量的是PCR循环结束时累计的PCR产物量