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广州管圆线虫检测试剂盒(酶联免疫法)
【产品名称】
通用名称:广州管圆线虫 IgG 抗体检测试剂盒
英文名称:Angiostroogylus cantonensis(A.c)IgG Antibody Test Kit
【包装规格】48 份/盒、96 份/盒
【预期用途】本试剂盒采用间接 ELISA 方法定性检测人血清或血浆中的广州管圆线虫 IgG 抗
体。
【检测原理】如果待检样品中含有广州管圆线虫 IgG 抗体,就会与包被板上的广州管圆线虫抗
原及第二步加入的抗人二抗酶标结合物特异性结合。间接结合在包被板上的抗人二抗酶标
结合物与底物反应的显色状况即可反映出样品中是否含有广州管圆线虫 IgG 抗体。
【主要组成成份】
序号 名称 规格(48T/96T) 序号 名称 规格
1 包被板 48/96 孔 7 终止液(6 号液) 6mL×1 瓶
2 酶结合物(1 号液) 3/6mL×1 瓶 8 阳性对照品 0.8mL×1 支
3 浓缩洗涤液(2 号液) 100mL×1 瓶 9 阴性对照品 0.8mL×1 支
4 底物(3 号液) 6mL×1 瓶 10 自封袋 1 个
5 显色剂(4 号液) 6mL×1 瓶 11 封板膜 2/3 片
6 样品稀释液(5 号液) 100mL×1 瓶 12 说明书 1 份
【储存条件及有效期】 2~8℃避光保存,防止冷冻,有效期为 12 个月。
【适用仪器】
含 450nm 和 630nm 波长的酶标仪;37℃恒温设备;可调单道/多道微量移液器。
【样品要求】
1. 本试剂适用于检测人血清或血浆;
2. 为取得优实验效果,避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品;
3. 短期(3 天内)将进行检测的血清样品可存放于 2~8℃;如需长期保存,应置于-20℃
或以下,避免反复冻融。
【检验方法】
1. 洗涤液配制:用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2 号液)按 1:10 稀释(例如,取
100mL 洗涤液 10×,加 900mL 蒸馏水或去离子水混合),充分混匀即为工作浓度洗涤
液。
2. 样品稀释:用样品稀释液(5 号液)将待检血清按 1:100 稀释(如 5μL 血清+495μL
样品稀释液),充分混匀。 阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。
3. 加样反应:样品孔,每孔仅加入 100μL 待检样品;空白对照 2 孔,每孔仅加入 100μL
样品稀释液;阴性对照 2 孔,每孔仅加入 100μL 阴性对照品;阳性对照 2 孔,每孔仅
加入 100μL 阳性对照品。盖好封板膜,37℃避光反应 30 分钟。
4. 洗板:甩去孔内液体,每孔注满(若用洗板机每孔加入 250μL)工作浓度洗涤液洗涤 3
次,每次均需停留 1 分钟;后一次甩净,拍干。
5. 加酶反应:除空白对照孔外,其余每孔加酶结合物(1 号液)1 滴,盖好封板膜,37℃
避光反应 30 分钟。甩去孔内液体,如上洗板,拍干。
6. 显色反应:加底物(3 号液)和显色剂(4 号液)各 1 滴,混匀,盖好封板膜,37℃避
光显色 10 分钟。
7. 终止反应: 加终止液(6 号液)1 滴,以空白对照调零,用酶标仪于 450nm 波长(630nm 作为参比波长)读取 OD 值。
【参考值】
1. Cut-off 值 (COV)=阴性对照平均 OD 值×2.1 (阴性对照孔 OD 值<0.07 时,按 0.07 计)。
2. 有效性判定:
阴性对照孔 OD 值≤0.10(若大于 0.10 则实验无效);
阳性对照孔 OD 值≥0.50(若小于 0.50 则实验无效)。
【检验结果的解释】
样品 OD 值≥COV,判为广州管圆线虫 IgG 抗体阳性;
样品 OD 值<COV,判为广州管圆线虫 IgG 抗体阴性。
【检验方法的局限性】 本试剂盒仅供研究用、不用于临床诊断;
【注意事项】
1. 包被板须密封防潮。从冷藏环境中取出时,应平衡至室温后,方可开封启用。未使用
完的板条应即时放回有干燥剂的自封袋中,2~8℃密封保存。
2. 加试剂前应将试剂瓶轻摇、混匀。
3. 瓶盖每次使用后要盖紧,各瓶盖之间不可混用。不同试剂盒的试剂组份不可混用。
4. 孵育时,推荐使用水浴箱。如无水浴箱,可取密封湿盒放入 37℃温箱内使用。
5. 用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性,须小心使用。
广州管圆线虫检测试剂盒(酶联免疫法)