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大鼠总血管紧张素原ELISA检测试剂盒（细胞因子）
| 中文名称 | 大鼠总血管紧张素原 ELISA检测试剂盒 |
| 英文名称 | Rat total angiotensinogen ELISA test kit |
| 产品货号 | 27414 |
| 产品规格 | 96T |
| 检测样本 | 大鼠血清,EDTA血浆,尿液,细胞上清 |
| 适应物种 | 大鼠 |
| 预期用途 | 用于大鼠血清,EDTA血浆,尿液,细胞上清中血管紧张素原的定量检测 |
| 产品品牌 | 日本IBL |
| 供应商家 | 深圳市科润达生物工程有限公司 |
试剂盒原理
大鼠总血管紧张素原试剂盒（细胞因子）运用了两种特异性抗体,洗板后加入TMB底物液显色,显色的强度与大鼠血管紧张素原的量成正比.
检测范围
0.08 - 5.0 ng/mL
(1.5 – 96.2 pmol/L ,由于大鼠血管紧张素原的分子量为52 kDa)
预期用途
■大鼠总血管紧张素原试剂盒（细胞因子）能用于大鼠血清,EDTA血浆,尿液,细胞上清中血管紧张素原的定量检测. 如需稀释,请用EIA缓冲液稀释
■建议尿液样品的稀释约32倍
■建议血清和EDTA血浆样品稀释约2000倍
■细胞上清的稀释倍数随所选取的细胞不同而不同, 因此,具体稀释倍数视每个实验室优化而定.
大鼠总血管紧张素原试剂盒（细胞因子）
主要成份
| 名称 | 数量 | 成分 |
| 预包被板 | 96T | 抗大鼠血管紧张素原(135)兔子IgG,亲合纯化 |
| 酶标记抗体 | 0.4mL x 1 | (30倍浓缩)HRP标记抗大鼠血管紧张素原(405)兔子IgG,亲合纯化 |
| 标准品 | 1.0mL x 2 | 重组大鼠血管紧张素原 |
| EIA缓冲液 | 30mL x 1 | 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS |
| 标记抗体稀释液 | 12mL x 1 | 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS |
| 显色剂 | 15mL x 1 | TMB底物液 |
| 终止液 | 12mL x 1 | 1N硫酸 |
| 浓缩洗涤液 | 50mL x 1 | (40倍浓缩) 含1% BSA, 0.05%吐温20 BPS |
实验所需器材(试剂盒内不提供)
| ★ | 酶标仪(450nm) 微移液管及其枪头 |
| ★ | 量筒及烧杯 去离子水 |
| ★ | 温育箱(37°C ± 1°C) 坐标纸(log/log) |
| ★ | 吸水纸 试管(用于标准品稀释) |
| ★ | 洗瓶 (用于洗板) |
| ★ | 一次性试剂管(用于浓缩酶标记抗体和显色剂) |
实验步骤
使用前，将所有试剂应平衡至室温，大约30min，充分混匀，确保试剂质量无改变，标准曲线和样品检测必须同时进行.
| 试剂 | 待检测样品 | 标准品 | 样品空白 | 试剂空白 |
| 检测样品100ul | 稀释标准品（1-7管）100ul | EIA缓冲液（第8管） 100ul | EIA缓冲液100ul | |
| 盖板，于37°C下温育60min | ||||
| 洗板7次 | ||||
| 酶标抗体 | 100ul | 100ul | 100ul | - |
| 盖板，于37°C下温育30min | ||||
| 洗板9次 | ||||
| 显色剂 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
| 室温避光温育30min | ||||
| 终止液 | 100ul | 100ul | 100ul | 100ul |
| 加终止液后,30min内于450nm处读取OD值 | ||||
| 1. | 设试剂空白对照，并于相应的微孔中加入100ul EIA缓冲液 |
| 2. | 确定好样品空白对照孔，检测样品孔和标准品孔，分别将100ul样品对照品(8号管)、检测样品和稀释好的标准品(1-7号管)加入到相应的微孔中。 |
| 3. | 盖板，37°C下温育60min |
| 4. | 用洗涤瓶剧烈洗板,再加入稀释洗涤液,静置15-30秒,再*倒去孔内反应液 重复洗板7次. 后在吸水纸上拍干,去除残留液滴 如用自动洗板机洗板,先自动洗4次,再按上述用洗瓶手工洗3次 |
| 5. | 除试剂空白对照孔外,其余每孔各加100ul酶标抗体 |
| 6. | 盖板，37°C下温育30min |
| 7. | 按照上述步骤4）洗板9次 |
| 8. | 用一次性试管取所需量的显色剂，各加100ul显色剂于微孔中.为了避免污染，勿将剩余试剂在倒回试剂瓶中 |
| 9. | 室温避光温育30min，加入显色剂后溶液颜色会变成蓝色 |
| 10. | 每孔各加100ul终止液，溶液颜色会变成黄色 |
| 11. | 擦去微孔板底部的污迹或水滴，确保微孔内溶液无气泡产生.加入终止液后30min内于酶标仪 450nm处读取结果 |
| 12. |
存储与有效期
存储条件: 2 - 8°C
有效期见试剂盒外包装
本译文仅供参考，详情请以原文为准
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