大鼠GRO/CINC-1检测试剂盒

【预期用途】

此试剂盒可用于定量检测大鼠血清、EDTA-血浆和细胞上清液中的GRO/CINC-1。重组和天然形式GRO/CINC-1均可检测。本产品仅用于研究，不用于诊断。

【前言简介】

细胞因子诱导的中性粒细胞趋化剂-1（CINC-1）最初是从IL-1β刺激的大鼠肾上皮样细胞（NRK-52E）条件下的培养基中纯化的。渡边富山医学和制药大学的研究小组在1989年确定了编码大鼠CINC-1的氨基酸序列。CINC-1是趋化因子的α（CXC）亚家族中的一员。另外三种大鼠CXC趋化因子（CINC-2α，CINC-2β，CINC-3/MIP-2）已被鉴定出来。CINC-1的蛋白序列与CINC-2α、CINC-2β、CINC-3/MIP-2的蛋白序列同源性为63 - 67%。此外，GROα、GROβ和GROγ与CINC-1的一致性分别为68%、71%和69%。这已经表明，CINCs是人类GROs的大鼠对应物。

【检测原理】

大鼠GRO/CINC-1检测试剂盒基于固相夹心法原理，利用两种高特异性抗体进行检测。四甲基联苯胺（TMB）作为一种显色原，显色强度与大鼠GRO/CINC-1的量成正比。

【试剂盒组分】

1）微孔板：            96孔，包被抗大鼠GRO/CINC-1兔IgG亲和纯化

2）标记抗体：          30倍浓缩，1x0.4ml，HRP-抗大鼠GRO/CINC-1兔IgG Fab’亲和纯化

3）标准品：            2x0.5ml，重组大鼠GRO/CINC-1

4）EIA缓冲液：        1x30ml

5）标记抗体溶液：      1x12ml

6）底物液：            1x15ml

7）终止液：            1x12ml

8）洗涤缓冲浓缩液：    1x50ml，40倍浓缩

【储存】

试剂盒应储存于2-8℃中，其有效期在试剂盒上注明，不要使用过期试剂。

【试剂制备】

（1）洗涤缓冲液

使用前平衡至室温，并轻轻混合均匀

50mL洗涤缓冲浓缩液+1950mL蒸馏水，混合均匀，得到洗涤缓冲液工作液，稀释后的洗涤缓冲液在冰箱中可储存2周

（2）标记抗体

在一次性试管中用标记抗体溶液30倍稀释标记抗体浓缩液，若使用1条微孔板（8孔），需要800μL标记抗体，即30μL标记抗体浓缩液+870μL标记抗体溶液，混合均匀

仅在使用前进行制备，标记抗体浓缩液应在4℃下密封储存

（3）标准品

向标准品中加入0.5mL蒸馏水使其溶解，得到的标准品浓度为600pg/mL。

准备8支试管并向每支试管中加入230μL EIA缓冲液

将230μL重建后的标准品加入试管1中，轻轻混匀；将230μL试管1中溶液加入试管2中，混合均匀。连续2倍稀释制备7个标准品浓度，范围为300 - 4.69pg/mL，试管8浓度为0pg/mL，作为样本空白

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