产品简介
果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)试剂盒 糖异生系列
货号:BC0920
规格:50管/48样
测试方法:紫外分光光度法
果糖-1,6二磷酸酶又称果糖1,6二磷酸酯酶,催化1,6二磷酸果糖和水生成6磷酸果糖和无机磷,在糖的异生代谢和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。
详细介绍
果糖-1,6-二磷酸(酯)酶(FBP)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号: BC0920规格: 50T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体18 μL×1瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体245 μL×1瓶 | -20℃保存 |
试剂四 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:试剂一:临用前加入45 mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂于2-8℃保存。
试剂二:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂分装后-20℃保存,避免反复冻融。
试剂三:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前加入2.5 mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂分装后-20℃保存,避免反复冻融。
产品说明:果糖-1,6-二磷酸酶(Fructose 1,6-bisphosphatase,FBP)又称果糖-1,6-二磷酸酯酶,其在糖异生过程和光合作用同化物蔗糖的合成中起关键性的作用。催化1,6-二磷酸果糖和水生成6-磷酸果糖和无机磷。FBP催化1,6-二磷酸果糖和水,生成6-磷酸果糖和无机磷,在反应体系中添加的磷酸葡萄糖异构酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH,测定340nm下NADPH的增加速率,即可计算FBP活性。注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品:紫外分光光度计、天平、低温离心机、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰盒、蒸馏水。操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:当ΔA大于0.6时,建议将样本稀释后再进行测量。
空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.02。
实验实例:取0.1g肝脏加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管=A2测定-A1测定=0.756-0.647=0.109,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.074-0.062=0.012,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.109-0.012=0.097,按样本质量计算酶活得:
FBP(U/g 质量)=321.5×ΔA÷W=321.5×0.097÷0.1=311.855 U/g 质量。取0.1g黑麦草加入1mL提取液进行匀浆研磨,取上清后按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管= A2测定-A1测定=0.785-0.609=0.176,ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.074-0.062=0.012,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.176-0.012=0.164,按样本质量计算酶活得:
FBP(U/g 质量)=321.5×ΔA÷W=321.5×0.164÷0.1=527.26 U/g 质量。相关系列产品:BC0730/BC0735*酸羧化酶(PC)活性检测试剂盒BC3310/BC3315 磷酸烯醇式*酸羧激酶(PEPCK)活性检测试剂盒BC3320/BC3325 葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)活性检测试剂盒 果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)试剂盒 糖异生系列 果糖-1,6-二磷酸酶(FBP)试剂盒 糖异生系列