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糜*白酶活性检测试剂
盒说明书
紫外分光光度法
货号:BC2330
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体50 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂二:临用前溶于4 mL甲醇中,再用水定容至25 mL。可分装后-20℃保存,避免反复冻融。
产品说明:
糜*白酶,又称胰凝 *白酶,是胰腺分泌的一种蛋白水解酶,能迅速分解变性蛋白质。糜*白酶的功能与胰*白酶相似,但是具有分解能力强、毒性低和不良反应小等优点。临床上糜*白酶用于痰液稀化,对脓性和非脓性痰液均有效;也用于创伤或手术后伤口愈合,如白内障摘除。
糜*白酶催化BTEE水解,产物在256nm有特征光吸收;通过测定256nm光吸收增加速率,来计算糜*白酶活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料”附件
注意事项:
当ΔA大于0.2或者吸光值大于1时,建议将样本用提取液稀释后测定。
当ΔA小于0.03时,建议将样本浓缩或者增加样本体积进行测定,注意计算公式除以浓缩倍数或者改变体积。
实验实例:
取0.1g兔肾脏加入1mL提取液进行冰浴匀浆。8000g,4℃离心10min,取上清后再用提取液稀释10倍,之后按照测定步骤操作,测得计算ΔA=A2-A1=1.043-0.94=0.103,按样本质量计算酶活得:糜*白酶活(U/g 质量)=3.8×ΔA÷W×10(稀释倍数)=39.14 U/g 质量。
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