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生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品分类:结缔染色
储存条件:4℃,避光,12个月
用途:区分结缔组织蛋白多糖中是否硫酸软骨素和透明质酸
注意事项:根据透明质酸酶可以裂解透明质酸和硫酸软骨素的糖苷键这一特性,同时联合使用阿利新蓝染色液,使上述物质不着色,而未处理的呈亮蓝色,该法需要做阳性对照。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
透明质酸染色液 | 2×50ml | FS-R6726 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
洋川芎内酯I(标准品) L-Alanamine Hydrochloride丝/苏蛋白激蛋白抗体包装25g
洋蓟;1,5-二咖啡酰奎宁(标准品) L-Histidine monohydrate monohydrochlorideHAUS5蛋白抗体包装1ml
氧代川南亭碱(标准品) L-Homoarginine Hydrochloride 组织H4受体抗体包装1ml
氧化白藜芦(标准品) TPCKmRNA cap基转移抗体包装1ml
氧化白藜芦-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 TPCK5’-三磷聚核苷抗体包装1g
氧化白藜芦-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 Ala-Gln 组三聚体核苷结合蛋白1抗体包装25g
氧化(标准品) H-Arg-OMe·2HCl状腺促进激alpha链包装5g
氧化槐果碱(标准品) D-Alaninamide hydrochlorideA型流感病H7N9凝集抗体包装1g
氧化(标准品) Fenticonazole Nitrate组蛋白去乙酰化3抗体包装250mg
氧化前胡(标准品) 1-Benzyl D-Glutamate人乙肝表面抗原抗体(包被)包装5g
氧化芍药苷,羟基芍药苷(标准品) D-Phenylalanine 肾损伤分子1抗体(型肝炎病受体1)包装1ml
药根碱(标准品) D-Alanine组富含脯糖蛋白抗体包装1ml
野百合碱(标准品) β-AlanineHER3受体抗体包装100g
野(标准品) β-Alanine磷化HER3受体抗体包装25g
野黄芩(标准品) D-Tryptophan磷化HER3受体抗体包装100g
强酒海杆菌Marinobacter│vinifirmus 质量规格:HPLC≥98.0% ,标准品卵巢癌抗原X1试剂盒;Caffeine
阴沟肠杆菌Enterobacter│cloacae 质量规格:>99%,AR离子胞内通道蛋白4试剂盒比多巴;S-(-)-Carbidopa
: AS4.867资源名称: 天蓝色链霉菌 质量规格:>98.5%,BR绿脓杆菌外A试剂盒基异茜草;Rubiadin、 1,3
透明质酸染色液BKCa channels(calcium-activated potassium channel) 钙激活钾通道蛋白规格: 0.5mg
BTG2/TIS21(B-cell translocation gene 2) BTG2(抗原)规格: 0.5mg
C-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一种原癌基因)抗原规格: 0.5mg
C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)规格: 0.5mg
cyclin D1 周期suD1(抗原)规格: 0.5mg