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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
糊精水溶液 | 100ml | FS-R7011 |
产品分类:脂类染色
储存条件:室温,12个月
用途:油红O染色中的衬染剂
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
假黄单胞菌属癌胚抗原单克抗体(检测)Human CREB3L2 ELISA Kit山羊脑啡肽(ENK)免疫试剂盒
冻土毛霉癌基因c-Raf抗体Human CREST ELISA Kit山羊免疫球蛋白M(IgM)免疫试剂盒
两歧双歧杆菌Ⅲ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白抗体Human CREB1 ELISA Kit山羊免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒
球形节杆菌黑色瘤相关抗原抗体Human Claudin 7 ELISA Kit山羊免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒
黄孢紫红菇CD33抗体Human CREB3L2 ELISA Kit山羊粒巨噬集落激因子(GM-CSF)免疫试剂盒
希瓦氏菌*睫状神经营养因子受体α抗体Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊口蹄疫抗体(FMDV IgM)免疫试剂盒
酿酒酵母CD7抗体Human CKS2 ELISA Kit山羊(Cortisone)免疫试剂盒
果生链核盘菌尾型同源盒转录因子2抗体Human CEP44 ELISA Kit山羊抗尿激/血管加压/精加压(ADH/VP/AVP)免疫试剂盒
短芽孢杆菌CD68抗体Human CEP55 ELISA Kit山羊结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)免疫试剂盒
东方伊萨酵母紧密连接蛋白1抗体Human CD94 ELISA Kit山羊碱性成纤维生长因子(bFGF)免疫试剂盒
尖孢镰刀菌膜辅蛋白抗体Human CD9(CD9 antigen) ELISA Kit山羊甲状腺(T4)免疫试剂盒
委内瑞链霉菌CXC趋化因子16抗体Human CEP63 ELISA Kit山羊甲状旁腺激(PTH)免疫试剂盒
新疆盐地杆菌色c氧化IV亚型1抗体Human CEP350 ELISA Kit山羊黄体生成(LH)免疫试剂盒
球孢枝孢1号染色体开放阅读框227抗体Human CDC14B ELISA Kit山羊氧化(XOD)免疫试剂盒
苏云金芽孢杆菌2号染色体开放阅读框71抗体Human CD81(CD81 antigen) ELISA Kit山羊还原型(GSH)免疫试剂盒
淡青链霉菌质膜微囊蛋白-1抗体Human CEP44 ELISA Kit山羊过氧化氢(CAT)免疫试剂盒
酵母菌Saccharomyces│sp. 质量规格:>98%,BRp物质试剂盒次碱
木霉Trichoderma│sp. 质量规格:>98%,BRP钙黏蛋白/胎盘钙黏蛋白试剂盒罗汉松树脂
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格:>98%,BRProminin 2试剂盒定碱
糊精水溶液CGRP(Human calcitonin gene related peptide) ELISA Kit 人降钙su基因相关肽规格: 48T
SS(Human Somatostatin) ELISA Kit 人生长抑su规格: 48T
GHRP(Human Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 人生长激su释放多肽规格: 48T
INH-B(Human inhibin B) ELISA Kit 人抑制suB规格: 48T
TRH(Human growth hormone releasing hormone) ELISA Kit 人促jia状腺su释放激su规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。