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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
磷脂染色液 | 4×100ml | FS-R7014 |
产品分类:脂类染色
储存条件:室温,避光,12个月
用途:磷脂染色
注意事项:磷脂、神经髓鞘磷脂和核蛋白呈蓝黑色,胞质呈灰黄色。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
大豆慢生根瘤菌末端补体复合物抗体Human CCNL1 ELISA Kit山羊白介1β(IL-1β)免疫试剂盒
多杀性巴氏杆菌8号染色体开放阅读框55抗体Human CD209 ELISA Kit山羊白介1α(IL-1α)免疫试剂盒
粗柄羊肚菌补体C4a+C4b蛋白抗体Human Cathepsin H ELISA Kit山羊白介18(IL-18)免疫试剂盒
大肠埃希菌CD44V7抗体Human CBP20 (NCBP 20 kDa subunit) ELISA Kit山羊白介12(IL-12/P40)免疫试剂盒
变灰链霉菌CD44V10抗体Human CCDC158 (Coiled-coil domain-containing protein 158) ELISA Kit山羊白介10(IL-10)免疫试剂盒
秀珍菇CD44V4抗体Human BTN3A1 (Butyrophilin Subfamily 3 Member A1) ELISA Kit山羊阿黑皮原(POMC)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌紧密连接蛋白4抗体Human BBX(HMG box transcription factor BBX) ELISA Kit山羊γ干扰(IFN-γ)免疫试剂盒
盔形毕赤酵母6号染色体开放阅读框140抗体Human BTNL2(Butyrophilin-like protein 2) ELISA Kit山羊β-脂蛋白(β-LP)免疫试剂盒
金横裂链霉菌L型钙通道蛋白抗体Human BCAS1 ELISA Kit山羊β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒
乳明串珠菌电压依赖性钙通道Cav3.1抗体Human BTNL8 ( Butyrophilin-like protein 8) ELISA Kit山羊α1性糖蛋白(α1-AGP)免疫试剂盒
热带假丝酵母紧密连接蛋白3抗体Human BubR1 (MAD3/BUB1-related protein kinase) ELISA Kit山羊toll样受体2(TLR2)免疫试剂盒
露湿粘座孢霉(或露湿漆斑菌)磷化原癌基因c-Jun抗体Human BCAT1/ECA39 ELISA Kit山羊M型肌激(CKM)免疫试剂盒
壳囊孢属磷化原癌基因c-Jun抗体Human BCL2L10 ELISA Kit山羊C型钠尿肽(CNP)免疫试剂盒
穗状平脐蠕孢1号染色体开放阅读框86抗体Human BCL6(B-cell lymphoma 6 protein) ELISA Kit山羊C反应蛋白(CRP)免疫试剂盒
芽胞杆菌8号染色体开放阅读框59抗体Human BRD9 (Bromodomain-containing protein 9) ELISA Kit山羊CD14分子(CDl4)免疫试剂盒
紫色直丝链霉菌磷化补体成分5受体1抗体Human C14orf28 (Dopamine receptor-interacting protein 1) ELISA Kit山羊Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)免疫试剂盒
鸭瘟立默氏菌Riemerella│anatipestifer 质量规格:>99%,BRP2蛋白抗体试剂盒苦龙胆酯苷
芽孢杆菌属菌种Bacillus│T. 质量规格:>98%,植物激级P27蛋白试剂盒康普瑞磷二钠
酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格:BRP0蛋白抗体试剂盒康普瑞
磷脂染色液NA(Human Noradrenaline) ELISA Kit 人去jia肾上腺su规格: 48T
PGF(Human Prostaglandin F) ELISA Kit 人前列腺suF规格: 48T
PGE1(Human Prostaglandin E1) ELISA Kit 人前列腺suE规格: 48T
ET-1(Human Endothelin 1) ELISA Kit 人内皮su1规格: 48T
FSH(Human follicle-stimulating hormone) ELISA Kit 人促卵泡su规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。