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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
乙酸铵溶液 | 100ml | FS-R7352 |
产品分类:核酸提取
储存条件:4℃,12个月
用途:分析试剂、防腐剂、缓冲剂、提供乙酸根,水溶液显中性
注意事项:无菌溶液。主要由乙酸铵/醋酸铵、去离子水组成,溶液pH在7左右,显中性,经过滤除菌。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
瘦受体抗体Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白20(CK-20)
枯草芽孢杆菌项韧带弹性蛋白抗体Human PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白20(CK20)
粘鞭霉氧化低密度脂蛋白抗体Human IL20RA(Interleukin-20 receptor subunit alpha) ELISA Kit角蛋白19(CK-19)
香菇转化生长因子β结合蛋白4抗体Human PIK3C2B ELISA Kit角蛋白18-M65(CK 18-M65)
香菇G蛋白偶联受体69BHuman PIK3IP1 ELISA Kit角蛋白18-M30(CK 18-M30)
草青霉李斯特菌菌体蛋白抗体Human PIK3C2G ELISA Kit角蛋白18(CK-18)
假单胞菌属Rho的鸟核苷交换因子12抗体Human PILRA ELISA Kit角蛋白17(CK17)
果生链核盘菌白血病相关蛋白5抗体Human PIGB ELISA Kit角蛋白13(CK-13)
三棱孢小囊菌富含亮重复蛋白62抗体Human PIM2(Serine/threonine-protein kinase pim-2) ELISA Kit间粘附分子3(ICAM-3/CD50)
米氏假单胞菌淋巴磷蛋白磷相关蛋白抗体Human PI3K p55(gamma) ELISA Kit间粘附分子2(ICAM-2/CD102)
解淀粉周培瑾氏菌含亮神经胶质瘤失活蛋白4抗体Human KLB(Beta-klotho) ELISA Kit间粘附分子1(ICAM-1/CD54)
皱曲毛壳淋巴性白血病相关序列1抗体Human PIF1 ELISA Kit间粘附分子1(ICAM-1)
鼠乳杆菌L-瓜抗体Human PICK1 ELISA Kit性T淋巴相关抗原4(CTLA-4/CD152)
酿酒酵母半胱蛋白抗体Human PIGK ELISA Kit相关蛋白A(CagA)
酿酒酵母乳脱氢D抗体Human PIG3 ELISA Kit(CTX)
福氏志贺氏菌蛋白激LYK5抗体Human PIGA ELISA Kit凋亡抑制因子(IAP)
传染性法氏囊病病毒Avibirnavirus│Infectious bursal disease virus 质量规格:>97.0%(HPLC)(N)松脂二葡萄糖苷
弯孢单顶孢Monacrosporium│gampsosporum 质量规格:>98.0%(HPLC)(N)吴茱萸次碱
小单孢菌Micropolyspora│sp. 质量规格:>90.0%(HPLC)吴茱萸碱
乙酸铵溶液MIP-1 Delta(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1 Delta) ELISA kit 小鼠巨噬细胞炎性蛋白1δ规格: 48T
PARC(Mouse pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 小鼠肺部活化调节趋化因子规格: 48T
LZM(Mouse Lysozyme) ELISA Kit 小鼠溶junmei规格: 48T
sCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) Elisa Kit 小鼠可溶性CD30规格: 48T
sMHC-2(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重链规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。