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生产厂家厂商性质
上海市所在地
产品分类:核酸提取
储存条件:—20℃,3个月
用途:添加剂
注意事项:无菌溶液。主要亚精胺、去离子水组成。过滤除菌。
公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
亚精胺溶液 | 1ml | FS-R7350 |
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。
放射形根瘤菌MD-1蛋白抗体Human PLA2G4B ELISA Kit纤溶原激活物抑制因子1(PAI-1)
炭疽芽胞杆菌MD-2蛋白抗体Human PLA2G4E ELISA Kit纤溶原激活物抑制因子(PAI)
短芽孢杆菌淋巴管内皮透明质受体抗体Human PLA2G4F ELISA Kit纤溶原激活剂抑制物(PAI-1)
小孢根霉寡孢变种肝脏型脂肪结合蛋白抗体Human PON3(Serum paraoxonase/lactonase 3) ELISA Kit纤溶原激活剂(PLGA)
谷棒杆菌Ⅰ型荧光抗体Human PLAC1L ELISA Kit纤溶原(Plg)
反卷毛壳亮基肽3抗体Human PLAGL2 ELISA Kit纤溶抗纤溶复合物(PAP)
耳匙菌肝脏型脂肪结合蛋白抗体Human PKMYT1 ELISA Kit纤溶/纤维蛋白溶(PL/Fbn)
耐寒短杆菌肿瘤抑制基因LPP2抗体Human MAGEC1(Melanoma-associated antigen C1) ELISA Kit纤连蛋白(FN)
异常汉逊酵母肿瘤抑制基因LATS1抗体Human PITX1 ELISA Kit细菌性病(BV)
枯草芽孢杆菌磷化单丝蛋白激1/2抗体Human PITX2 ELISA Kit周期D3(Cyclin-D3)
芥黄蜜环菌磷化肿瘤抑制基因LATS1抗体Human PIWIL2 ELISA Kit周期D2(Cyclin-D2)
苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种磷化丝/苏蛋白激抗体Human PIWIL1 ELISA Kit周期D1(Cyclin-D1)
贝莱斯芽胞杆菌磷化丝/苏蛋白激抗体Human PKC iota ELISA Kit周期A2(Cyclin-A2)
围小丛壳菌磷化丝/苏蛋白激抗体Human HDL(High-density lipoprotein) ELISA Kit周期蛋白依赖性激2(CDK2)
镰孢霉黄体激释放激类似物抗体Human PJA1 ELISA Kit周期蛋白A1(CCNA1)
Winogradskyella pulchriflava 磷化核纤层蛋白A/C抗体Human PKIG ELISA Kit因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)
蜡样芽孢杆菌Bacillus│cereus 质量规格:>98.0%(HPLC)枣仁皂苷A
CGMCC1.1969=ATCC33653资源名称: 最小弧菌 质量规格:化学发光试剂三七皂苷R1
链格孢霉属Alternaria│sp. 质量规格:含氮量:9.00-10.30 %连翘苷
亚精胺溶液Mouse Beta-catenin, Beta-cat ELISA Kit 小鼠β连环蛋白/联蛋白规格: 48T
Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 小鼠垂体腺suan环化mei激活肽规格: 48T
Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit 小鼠血管紧张su转化mei规格: 48T
Mouse angiotension II ,ANG- II ELISA Kit 小鼠血管紧张suⅡ规格: 48T
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化细胞内分泌因子/双调蛋白规格: 48T