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产品分类：免疫组化

储存条件：室温,12个月

用途：抗原修复缓冲液

注意事项：主要由H2O2-甲醇溶液、柠檬酸缓冲液组成。

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

球孢白僵菌硫乙酰肝蛋白多糖2Human SRX1(Sulfiredoxin-1) ELISA Kit大鼠二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)免疫试剂盒

金9401(金针菇)肝癌相关抗原hca25aHuman SS18L2 ELISA Kit大鼠二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)免疫试剂盒

名称己糖激3抗体Human FZD1(Frizzled-1) ELISA Kit大鼠二氧化(DAO)免疫试剂盒

黄柄曲霉人乙肝病pre S1/S2蛋白抗体Human SSH3 ELISA Kit大鼠儿茶抑免疫试剂盒

黑曲霉人乙肝病pre S1蛋白抗体Human SRFBP1 ELISA Kit大鼠儿茶(CA)免疫试剂盒

盾壳霉己糖激1抗体Human SSR4 ELISA Kit大鼠多药耐药蛋白1(ABCB1)免疫试剂盒

酿酒酵母己糖激2抗体Human SRGAP2 ELISA Kit大鼠多肽YY/酪酪肽(PYY)免疫试剂盒

斜卧青霉热休克蛋白90α抗体Human SRGAP1 ELISA Kit大鼠多巴转运蛋白(DAT)免疫试剂盒

大肠埃希菌肝源性纤维蛋白原相关蛋白1抗体Human SSRP1 ELISA Kit大鼠多巴D2受体配体(D2RL)免疫试剂盒

果蔬汁 三唑磷、、磷、 乙酰磷红分化相关基因蛋白抗体Human SSSCA1 ELISA Kit大鼠多巴D2受体(D2R)免疫试剂盒

细致交链孢同源异型盒基因HOXA13抗体Human SRGAP3 ELISA Kit大鼠多巴D1受体(D1R)免疫试剂盒

热带假丝酵母磷化组蛋白去乙酰化4(Ser246)抗体Human SSTR3 ELISA Kit大鼠多巴(DA)免疫试剂盒

大肠埃希氏菌磷化组蛋白去乙酰化7抗体Human SRI ELISA Kit大鼠对氧磷1(PON1)免疫试剂盒

木葡萄球菌磷化组蛋白去乙酰化4抗体Human FZD3(Frizzled-3) ELISA Kit大鼠端粒(TE)免疫试剂盒

滑菇磷化组蛋白去乙酰化7抗体Human SSTR5 ELISA Kit大鼠蕈碱型乙酰受体(M-AChR)免疫试剂盒

浅绿黄假单胞菌HIRA相互作用蛋白3抗体Human ST6GALNAC5 ELISA Kit大鼠顶体蛋白(ACR)免疫试剂盒

天山中慢生根瘤菌Mesorhizobium│tianshanense 质量规格：分析标准品松萝

发酵假丝酵母Candida│fermentati 质量规格：分析标准品汉黄芩

DSM 22959Akkermansia muciniphila 质量规格：分析标准品葫芦B
微波辐射抗原修复试剂盒HSP-20 ELISA Kit  大鼠热休克蛋白20规格： 48T

A Beta1-40 ELISA Kit  大鼠β淀粉样蛋白1-40规格： 48T

Cyclin-D3 ELISA Kit  大鼠细胞周期suD3规格： 48T

Cyclin-D2 ELISA Kit  大鼠细胞周期suD2规格： 48T

Cyclin-D1 ELISA Kit  大鼠细胞周期suD1规格： 48T

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。