Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
Standard Grade 牛血清白蛋白
¥238蛋白酶抑制剂Cocktail,EDTA-free
面议RIPA裂解液(强)
面议His标签蛋白琼脂糖纯化树脂
¥498小鼠抗β-actin单克隆抗体
面议ECL化学发光超敏显色试剂盒
面议Human Recombinant Insulin 重组-人胰岛素
¥320鼠源RNase抑制剂(Murine RNase Inhibitor)
面议Streptavidin链霉亲和素
面议过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)
面议Human IgG 人免疫球蛋白G
面议NP-40 Lysis Buffer NP-40裂解液
¥228SUMO Protease
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
SUMO Protease | 20410ES60 | 100 U | 223.00 |
SUMO Protease | 20410ES70 | 500 U | 873.00 |
SUMO Protease | 20410ES80 | 1000 U | 1473.00 |
产品描述
SUMO蛋白酶识别完整的含有100个氨基酸的SUMO(Small Ubiquitin-like Modifier)标签蛋白,并能高效地把SUMO从融合蛋白上切割下来。与EK和TEV等蛋白酶的识别位点相比,由于其识别序列长,所以SUMO蛋白酶酶切反应有很高的特异性,且在较宽范围的反应环境体系中保持较高的活力,例如温度(4-30℃)、pH(5.5-9.5)等。SUMO蛋白酶还具有多聚His标签,便于使用亲和层析的方法,去除SUMO蛋白酶,纯化目的蛋白。
产品组分
编号 | 组分名称 | 产品货号/规格 | ||
20410ES60 /100U | 20410ES70 /500U | 20410ES80 /1000U | ||
20410-A | SUMO Protease | 100 μL | 500 μL | 1000 μL |
20410-B1 | 10×Protease Buffer(-salt) | 200 μL | 1000 μL | 2 mL |
20410-B2 | 10×Protease Buffer(+salt) | 200 μL | 1000 μL | 2 mL |
注:该酶酶活定义使用10×Protease Buffer(-salt)。SUMO Protease在10×Protease Buffer(-salt)中活性相对较高,但对于不稳定的底物应选择10×Protease Buffer(+salt),我们也提供了+salt的反应缓冲液20410-B2,请根据您的实验选择正确的缓冲液。20410-B2:500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、1.5 M NaCl、10 mM DTT;20410-B1:500 mM Tris-HCl, pH 8.0、2% Igepal (NP-40)、10 mM DTT;
产品性质
中文别名(Chinese synonym) | SUMO蛋白酶 |
英文别名(English synonym) | SUMO Protease |
来源(Source) | 大肠杆菌表达 |
标签(label) | 多聚His标签 |
纯度(Purity) | 经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度> 90% |
分子量(Molecular weight) | 26.55 kDa |
储存缓冲液(Buffer) | 25 mM Tris-HCl, pH 8.0、0.1% Igepal (NP-40)、250 mM NaCl、500 μM DTT、50% 甘油 |
酶活定义(Unit Definition) | 30℃,SUMO Protease 1小时酶切2 μg含有酶切位点的融合蛋白,酶切效率达85%以上所需的酶量定义为1个酶活力单位,即1U。 |
运输和保存方法
干冰运输;长期储存于-80℃,或解冻后保存于-20℃。有效期1年。
使用方法
1. 在EP管中配制如下反应体系(建议)
组分 | 体积(各组分可等比例减少) |
融合蛋白
| 50 μg |
10×Protease Buffer(常规条件下B1)
| 20 μL |
ddH2O
| to 200 μL |
SUMO Protease (1U/μL) | 10 μL
|
Total volume | 200 μL |
2. 30℃孵育,在1、2、4和6小时分别吸出20 μL上述反应液,置于单独的EP管中。
3. 向上述EP管中加入20 μL 2×SDS Loading Buffer,置于-20℃。
4. 样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取30 μL进行SDS-PAGE分析。确定///佳反应时间。
【注】如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,延长反应时间,并增加SUMO酶用量,以保证酶切效果。
表1. 不同温度下SUMO蛋白酶切活性
反应时间(h) | 不同温度下剪切活性(%) | |||
4℃ | 16℃ | 25℃ | 30℃ | |
0.5 | 48 | 73 | 83 | 88 |
1 | 60 | 87 | 90 | 93 |
2 | 71 | 94 | 94 | 95 |
3 | 74 | 95 | 95 | 95 |
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
HB201223