Yeasen/翌圣生物 品牌
生产厂家厂商性质
上海市所在地
线粒体红色荧光探针
¥425D-盐(D-Luciferin Potassium Salt)
面议TUNEL细胞凋亡检测试剂(tunel试剂盒)
面议TUNEL细胞凋亡检测试剂盒
面议Human Fibronectin 人纤维连接蛋白
面议Collagenase IV胶原酶IV型
面议D- 盐(D-Luciferin, Sodium Salt)
¥748FITC标记鬼笔环肽(FITC Phalloidin)
¥785TRITC Phalloidin 罗丹明标记鬼笔环肽
¥785Polybrene 聚凝胺(10 mg/mL)
面议1-Naphthylacetic acid 1-萘乙酸(α-萘乙酸,NAA),植物培养级别
面议胎牛血清(南美特级) Fetal Bovine Serum
面议产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) | *(元) |
MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit 一步法快速支原体检测试剂盒 | 40612ES25 | 25 T | 1653 | 952.00 |
40612ES60 | 100 T | 6283 | 3352.00 |
产品描述
MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit是利用Yeasen*的等温扩增技术,专门针对细胞培养液中支原体污染的快速检测产品。较以往支原体检测产品(货号:40611),本试剂盒中加入了UDG酶,以便去除含dU的PCR产物气溶胶污染,在极大程度上抑制假阳性反应,提高检测的准确度。而且加入的UDG酶在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活,不影响实验结果。
主要原理是若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA的保守序列会被大量、快速地扩增,使反应液由蓝紫色变成天蓝色,结果肉眼可辨,无需电泳。
翌圣MycAway™ Plus-Color One-Step Mycoplasma Detection Kit可以检测多种支原体,包括细胞培养过程中常见的8种支原体。传统巢式PCR支原体法检测法易受细胞培养上清中抑制物的影响,产生假阴性结果;反应后需开盖电泳检测,增加污染导致的假阳性风险。一步法支原体检测试剂盒*没有上述缺点,且其检测灵敏度、准确性远远高于PCR法。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 产品编号/规格 | |
40612ES25/25T | 40612ES60/100T | ||
40612-A | MycAwayTM -Color A | 600 μL | 600 μL×4 |
40612-B | MycAwayTM -Color B | 25 μL | 25 μL×4 |
40612-C | Positive Control | 10 μL | 10 μL×4 |
40612-D | 矿物油 | 500 μL | 500 μL×4 |
运输与保存方法
冰袋运输。
-20 °C避光保存,保质期18个月。若较长时间不用,请注意避光保存。
注意事项
1)使用本试剂前请仔细阅读说明书。
2)整个实验,应规范操作,包括反应体系的配制、样本处理及加样。
3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4)本产品仅作科研用途!
使用方法
1. 支原体待检样本准备
贴壁细胞:直接吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上,且汇合度达到90%左右时取样,此时上清中支原体含量较高,便于检出。
悬浮细胞:500 g离心5 min后,吸取上清。建议在细胞传代或换液3天以上时取样,此时支原体含量较高,便于检出。
2. 反应体系
将MycAwayTM -Color从-20 °C取出,溶解后颠倒混匀,瞬时离心确保所有液体落到管底。根据待检测样品量,配制如下体系(通常实验需要设置阴性对照和阳性对照):
单次反应体积 (μL) | 总体积 (μL) | ||
MycAwayTM -Color A | 24 | × 样品数 | _____ |
MycAwayTM -Color B* | 1 | _____ |
【*】:B组分为粘稠液体,取样小心枪头粘连。。
3. 加样
待测样品:向其余反应管中加入1 μL待测培养上清;
阴性对照:第一支反应管中不加入任何样品,作为阴性对照;
阳性对照:向最后一个反应管中加入1 μL Positive Control,作为阳性对照。
【注】:1) 如果反应是在水浴锅中进行,则每管加入20 μL矿物油,以防止液体蒸发导致结果的误差。如果反应是在PCR仪中进行,不需要加矿物油。
2)实验室中支原体污染十分常见,鉴于本试剂盒反应灵敏,建议用户在超净台中配制组分,以免出现假阳性结果。
4. 反应条件
加完样后,先将样品在30 ℃放置5 min,再在水浴锅或PCR仪中,恒温63 °C孵育60 min。
【注】:本试剂盒所用酶对温度非常敏感,强烈建议使用PCR仪操作;如用水浴锅,应先加热使其达到规定温度后再反应。温差超过2 °C,将导致扩增效率降低,使阳性反应无法在说明书规定的时间内达到典型的天蓝色。
5. 结果判断
63 °C反应60 min后,立刻取出反应管,放于室温。在光线良好的环境中观察反应结果(建议以白纸为背景)。如果反应液仍为蓝紫色,则判定为阴性;若反应液为天蓝色,则判定为阳性。
【注】:在63 °C反应的时间必须准确计时,超过说明书规定的反应时间可能会出现假阳性。反应管不可开盖,否则会出现气空气中支原体污染反应,出现假阳性的现象。
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