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IAC-SEP®呕吐毒素免疫亲和柱能够特异性的纯化与浓缩样品中的呕吐毒素。呕吐毒素免疫亲和柱广泛地应用于粮食、食品、饲料、酒类、酱油、醋、酱及酱制品等样品的提取,该方法速度快、操作简单、准确性高,对准确灵敏的测定样品中的呕吐毒素起到十分重要的作用。
IAC-SEP®呕吐毒素免疫亲和柱适用于以下标准:
GB/T 23503-2009 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定-免疫亲和层析净化高效液相色谱法
SN/T 1571-2005 进出口粮谷中呕吐毒素检测方法-液相色谱法
原理
样品经甲醇+水提取液提取、过滤、稀释,然后通过键合有呕吐毒素特殊抗体的免疫亲和柱。此时,呕吐毒素被亲和柱中的抗体特异性的吸附,用水或缓冲液将免疫亲和柱上的杂质除去,然后用甲醇使抗体变性,从而将呕吐毒素从亲和柱上洗脱下来。zui后,用HPLC或荧光计进行定量检测。
储存条件
该亲和柱保存在2-8 °C条件下,不能冷冻,保质期为18个月。建议在室温(18-30°C)下使用。
实验溶液制备
HPLC流动相:乙腈/水(1+9):取100mL乙腈于1L容量瓶中,用纯水定容至1L,用0.22微米的尼龙筛过滤。
甲醇/水(2+8):取200mL甲醇于1L容量瓶中,用纯水定容至1L,用0.22微米的尼龙筛过滤。
标准溶液的配制:取呕吐毒素标准储备液,流动相为稀释液,配制标准品溶液。例如:取100uL标准品储备液100ug/mL于10mL容量瓶中,用流动相定容至10mL,那么,呕吐毒素标准品浓度为1.0ug/mL
注:配制好的标准品溶液冷藏保存有效期为7天。
pH 7.0 PBS溶液:称取8.0g氯化钠,1.44g磷酸氢二钠,0.24g磷酸二氢钾,0.2g氯化钾,用990mL纯水溶解,然后用浓盐酸调节pH值至7.0,zui后用纯水稀释至1000mL。
液相色谱条件
色谱柱:Cloversil-C18 4.6*150mm(5um)或4.6*250mm(5um)
流动相:乙腈/水(1+9)或 甲醇/水(2+8)
流速:0.8mL/min
检测器:紫外检测器波长218nm
进样体积:20~100uL