北京索莱宝|土壤基因组DNA提取试剂盒|D2600

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2017-04-07 15:22:57
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产品简介

土壤基因组DNA提取试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种土壤环境中提取微生物DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果,Z大限度的保留了微生物 DNA的多态性。

详细介绍

产品名称:土壤基因组DNA提取试剂盒 
产品编号:D2600
保存:室温(15℃-25℃)干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。
产品简介: 
土壤基因组DNA提取试剂盒适合于从褐土、淤泥、火山灰等各种土壤环境中提取微生物 DNA。对土壤中各种细菌、真菌有很好裂解效果,大限度的保留了微生物 DNA的多态性。  
土壤基因组DNA提取试剂盒采用我公司*的腐殖质吸附材料,可高效专一的去除各种腐殖质成分而丝毫不会影响 DNA 的产率,纯度较酚、氯仿抽提法提高数倍。  
使用土壤基因组DNA提取试剂盒提取的 DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR  、文库构建、Southern  杂交等实验。 
操作步骤: 
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。 
1、称取土壤样本 0.1-0.5g,在液氮中充分研磨成细粉末,加入450ul溶液A震荡混匀。  
     *  也可直接称取样本0.1-0.5g于离心管(建议使用2ml圆底管),加入450ul溶液A剧烈震荡混匀1-2min至没有固体块。 使用液氮研磨效果佳。  
2、加入50ul溶液B充分颠倒混匀(不要剧烈震荡),65℃水浴 6min,每2min充分颠倒混匀一次。  
3、加入100ul溶液C充分颠倒混匀(不要剧烈震荡),12000rpm离心10min   。  
4、将上清转移到新的离心管,12000rpm离心 2min。  
5、在吸附柱中加入200ul溶液D,将离心后的上清加入到带有溶液D的吸附柱中,用移液器吹吸几次混匀,12000rpm离心 1min。 
6、将收集管中的滤出液混匀后重新吸入吸附柱(必须),12000rpm离心1min。
7、倒掉收集管中的废液,在吸附柱中加入漂洗液 500ul,12000rpm离心1min。  
8、倒掉收集管中的废液,重复步骤7两次(共漂洗三次)。  
9、倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管,12000rpm离心 2min  。  
10、拿出吸附柱在室温干燥数分钟(因季节及气候等因素不等),或 50℃干燥 1min。  
11、将吸附柱放入一个新的离心管中加入 50-100ul  洗脱液(65℃预热),12000rpm离心1min。 
12、将离心管中的液体重新加入到吸附柱中,12000rpm离心 1min。离心管中即为土壤微生物DNA溶液。  
13、若产物 PCR 效果差,可以适当稀释 DNA产物,或添加 1/10 体积的 PCR 增强剂。 
土壤基因组DNA提取试剂盒注意事项: 
1、新鲜的土壤样本会得到更高的产率,不同样本在采样前应先查阅相应的佳保存条件。  
2、若溶液中出现浑浊可在 37℃水浴中溶解片刻至清澈,不会影响结果。  
3、在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀,否则会堵塞吸附柱,并影响产物纯度。  
4、洗脱缓冲液的体积好不少于50ul,体积过小会影响回收效率;建议使用土壤基因组DNA提取试剂盒附带的洗脱缓冲液,用水洗脱也会损失部分产物;DNA 应保存在-20 ℃避免反复冻融,以防降解。  
5、若产物含有腐殖质残余则会严重影响 DNA的光吸收值,应采取电泳检测和分光光度计检测相结合的方式鉴定。  
6、液体试剂避免接触皮肤,若意外接触应立即使用大量清水冲洗。 
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