产品名称：Tris-Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
产品编号：P1320
说明：Tris-Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒所提供的 APS（过硫酸铵）为固体粉末，使用前加入双蒸水溶解即配制成 10%APS 溶液（0.5g APS加5ml 双蒸水），将溶液分装后置于-20℃保存，通常半年内有效。溶液在使用中可放置4℃保存两周。 
产品简介： 
  常规的Tris-SDS-PAGE电泳的只能分辨大分子蛋白，对于相对分子量小的，尤其是10kD以下的蛋白分辨率极低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分离分子量在1-10 kD的蛋白及多肽，成为目前电泳法变性分离多肽的主要方法。Tris-Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒包括Tricine-SDS-PAGE凝胶制备所需全套试剂，只需自备蒸馏水，即可制备高质量各种浓度的凝胶，方便、快捷，电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。 
Tris-Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒注意事项： 
 1、10%APS配制后分装-20度保存。APS溶液不稳定，应尽量减少室温存放时间，每次取用后立即放回冰箱，以防失效；若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换，使用-20度保存的10%APS。 
 2、在凝胶配制过程中，尤其是液体混匀步骤，应尽量避免气泡的产生。 
3、在分离胶上层加蒸馏水时要小心操作，加水时速度不能太快。 
4、丙烯酰胺具有神经毒性，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。 
5、Tris-Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。
使用说明：
I   配制分离胶 
1、将不同体积的双蒸水、49.5%T 6%C 、凝胶缓冲液和甘油加入到离心管中混合。 
2、加入10%APS和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。 
3、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液（1mm的mini-gel，分离胶溶液加约4ml），然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层，使凝胶表面保持平整。 
4、静置，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。  
II  配制夹层胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水尽量吸去。 
1、将不同体积的双蒸水、49.5%T 3%C 和凝胶缓冲液加入到离心管中混合。 
2、加入10%过硫酸铵和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。 
3、将适量的夹层胶溶液迅速加至分离胶的上面（对于1mm的mini-gel，夹层胶溶液加约1ml），然后在夹层胶溶液上轻轻覆盖一层水层，使凝胶表面保持平整。 
4、静置，待夹层胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。 
III   配制浓缩胶
去除覆盖在夹层胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。 
1、将不同体积的双蒸水、49.5%T 3%C 和凝胶缓冲液加入到离心管中混合。 
2、加入10%过硫酸铵和TEMED，立即涡旋混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。 
3、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。 
4、待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。 
5、进行电泳操作。 
IV   电泳
将电泳槽放入4℃或冰水浴中，外槽加入阳极缓冲液（T1225），内槽加入阴极缓冲液（T1215），30V  预电泳10min，将样品（已经过 Tricine上样缓冲液P1325处理）加入点样孔后30V  电泳1小时，100V电泳至溴酚蓝到达胶底部后停止电泳，进行后续的考马斯亮蓝染色或电转。 
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