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Lipopolysaccharides From Escherichia coli 055:B5
L8880 脂多糖产品进口分装的,脂多糖效价大于等于500000 EU每mg,但每批产品效价有一定差别,我们产品主要是提供脂多糖的活性,相关应用方面的实验需要客户自己摸索和优化。
脂多糖(LPS)说明:
①脂质和多糖的复合物;②为革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分,脂多糖是内毒素的重要群特异性抗原(O抗原)。脂多糖由三部分组成。脂质A(Lipid A)为构成内毒素活性的糖脂,以共价键联结到杂多糖链,有两部分:一是核心多糖,在有关的株内是恒定的;另一O特异性链(O-specific chain)是高度可变的。大肠杆菌的脂多糖在实验室免疫学中是常用的B细胞促分裂因子即多克隆活化因子(polyclonal activator)。可用于细胞培养。
脂多糖(LPS)简介:
脂多糖,英文名称Lipopolysaccharides,简称LPS,是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种*成分,位于细胞壁的外层并暴露于非荚膜细菌的细胞表面,有利于维持细胞外膜的完整性,保护细菌免受胆汁盐和脂类抗生素的破坏。结构上,脂多糖由类脂A、核心多糖和O-多糖侧链组成。其中类脂质A是构成细菌内毒素的主要成分,决定其毒性强弱;而O-多糖侧链在不同细菌间是高度变化的,特异性决定细菌的血清型。
LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。正是LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。将LPS分别与FITC、TRITC或2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid (TNBSA)反应即可得到FITC、TRITC或TNP标记的LPS,主要用于非胸腺依赖性B细胞对细菌LPS的免疫应答研究。。
LPS可通过TCA、酚、酚-氯fang-石油醚等方法制备,其中后一种方法为粗提取法。TCA和酚提取得到的LPS在结构上、电泳图谱和内毒素水平均较相似,不同之处在于含有的核酸和蛋白质残留量不同,TCA法得到的LPS含有约2%的RNA和10%的变性蛋白。酚法提取的LPS含有达60%的RNA和少于1%的蛋白。用凝胶过滤层析可除去酚提取LPS中的残留蛋白,但是仍会留下约10-20%的核酸。进一步用离子交换层析法纯化可得到<1%蛋白和<1%RNA的LPS。
本品来源于血清型大肠杆菌O55:B55,用苯法提取而得。其内毒素水平不少于500,000 EU (endotoxin units)/mg,经分析,1ng相当于5EU(鲎试剂法)和10EU(显色法)。LPS O55:B55可用于刺激人腹腔巨噬细胞(1ng/ml)以及马腹腔巨噬细胞的活动(1-100ng/ml)。
来源:Escherichia coli 055:B5
溶解性:可溶于水(10mg/ml)或细胞培养基(1mg/ml),产生浑浊淡黄色溶液,溶于盐溶液经旋涡振荡并加热到70-80℃可得到一种浓度更高的LPS溶液(20mg/ml)。
使用方法:
1. LPS储存液的配制,用于细胞培养相关实验:将1mg LPS重悬于1ml无菌平衡盐溶液或细胞培养基,轻轻旋涡振荡直粉末*溶解,即得到1mg/ml的储存液。此储存液可进一步用无菌平衡盐或细胞培养基稀释需要的工作浓度。
2. LPS储存液的保存:本储存液(1mg/ml)可放在4℃保存,约一个月稳定;也可分装成单次用量后放到-20℃,2年稳定。避免反复冻融。
【注意】:1)LPS溶液应储存于硅烷化容器内,因为LPS可吸附于塑料或某些玻璃器皿,尤其当其浓度<0.1mg/ml时。但当LPS浓度大于1mg/ml时,上述吸附则可忽略不计。2)如使用玻璃器皿,则需旋涡振荡LPS溶液少30min,以重溶被吸附溶质。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。