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血清铁浓度检测试剂盒说明书
血清铁浓度检测试剂盒可见分光光度法规格为: BC1730 50T/48S
试剂一:粉剂×2瓶,4℃保存。临用前配制,加入10 mL蒸馏水充分溶解。
试剂二:粉剂×2瓶,4℃保存。临用前配制,加入313μL冰醋酸,加入10 mL蒸馏水充分溶解。
标准液:液体3mL×1瓶,1000μmol/L Fe3+标准液,4℃保存。临用前稀释8倍即125μmol/L的标准溶液进行实验。
血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁,该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。
亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+,Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色,在520nm处有吸收峰,测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。
可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、辅助试剂和蒸馏水。
1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到520 nm,蒸馏水调零。
2. 标准液:提前取出标准液稀释8倍即125μmol/L。
3. 操作表:
加入试剂(μL)
空白管
测定管
标准管
蒸馏水
400
-
-
125μmol/mL标准液
-
-
400
血清
-
400
-
试剂一
400
400
400
试剂二
400
400
400
混匀后盖紧,置于沸水浴5min,自来水冷却;加入200 μL试剂(自备),充分震荡混匀;室温10000rpm,离心10min,小心吸取上层液700 μL,加入1mL玻璃比色皿,于520 nm立即测定吸光度,分别记为A空白管,A测定管,A标准管。
血清铁含量(μmol /L)=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]
= 125×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液:125μmol/L Fe3+标准液。
1、血清铁含量少,所用器皿(EP管)需要注意,避免被铁污染。
2、试剂一和试剂二溶液不稳定,需现配现用,新配制的试剂只能当天使用。
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