苯丙氨酸解氨酶含量检测试剂盒说明书

分光光度法 货号: BC0210 规格:50 管/48 样

苯丙氨酸解氨酶含量检测产品简介： PAL（EC4. 3 1 5）广泛存在于各种植物和少数微生物中，是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶， 与一些重要的次生物质如木质素、异黄酮类植保素、黄酮类色素等合成密切相关，在植物正常生长 发育和抵御病菌侵害过程中起重要作用。PAL 催化 L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸 在 290nm 处有大吸收值，通过测定吸光值升高速率计算 PAL 活性。

试验中所需的仪器和试剂： 紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1ml 比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 产品内容： 提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存； 试剂一：液体 40mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：粉剂×3 瓶，4℃保存，临用前每瓶加入 4mL 双蒸水充分溶解待用；现配现用。 试剂三：液体 2.5mL×1 瓶，4℃保存；

操作步骤：

一、粗酶液提取： 称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000g，4℃离心 10min，取上清，置冰上待 测。

二、测定操作表： 试剂名称 测定管（μL） 对照管（μL） 样本 20 试剂一 780 800 试剂二 200 200 混匀，30℃准确水浴 30min 试剂三 40 40 混匀，静置 10min 后，用对照管调零，290nm 处记录测定管吸光值 A (A=A 测定管-A 对照管)。

PAL活性计算： （1）按样本蛋白浓度计算： 单位的定义：每 mg 组织蛋白在每 ml 反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个 酶活力单位。 PAL（U/mg prot）=A×反应总体积（1040μL）÷样本体积（20μL）÷反应时间(30min)÷0.1 ÷蛋白 浓度（mg/mL）=17.3×A ÷蛋白浓度（mg/mL） （2）按样本鲜重计算： 单位的定义：每 g 组织在每 ml 反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个酶活力 单位。 PAL（U/g 鲜重）=A×反应总体积（1040μL）÷﹝样本鲜重（g）×样本体积（20μL）÷V 样总（1mL）﹞ ÷反应时间(30min)÷0.1 =17.3×A ÷样本鲜重（g）
 

相关文献：

《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影响因子:3.032 PMID: