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QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for E. coli
QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒，大肠杆菌用
本产品是使用qPCR法（探针法）定量大肠杆菌来源基因组DNA的试剂盒。
推荐用于生物制药的质量管理以及生产工艺开发中的宿主细胞来源残留DNA检测。
◆特点
● 检测下限：≥0.003 pg/test
● 定量下限：≥0.03 pg/test
● 高线性的标准曲线
● 批次间差异小，再现性高
● 使用预混合缓冲液，操作简单
◆检测波长
● E. coli gDNA 520 nm（例：FAM）
● Internal Control 555 nm（例：HEX）
※Internal Control为非天然的合成DNA。
◆试剂盒组成
1×PCR Master Mix——2×1 mL
DNA Dilution Buffer (DDB) ——1×10 mL
E. coli Control DNA——1×40 μL
◆应用实例
标准曲线
使用本试剂盒对0.0003 pg~30,000 pg范围内的大肠杆菌来源gDNA进行qPCR检测，并制备标准曲线（n=3）。
即使是0.003 pg~30,000 pg这一大范围的浓度内，也能获得高线性的标准曲线。 |
pg/well | 30000 | 3000 | 300 | 30 | 3 | 0.3 | 0.03 | 0.003 | 0.0003 |
Ct | 15.655 | 19.011 | 22.335 | 25.709 | 28.932 | 31.941 | 33.825 | 37.731 | N.D |
15.393 | 18.976 | 22.414 | 25.675 | 28.875 | 31.684 | 34.866 | 38.012 | ||
15.713 | 19.091 | 22.400 | 25.696 | 28.945 | 31.657 | 34.507 | N.D | ||
Average Ct | 15.587 | 19.026 | 22.383 | 25.693 | 28.917 | 31.760 | 34.399 | 37.872 | |
S.E | 0.1707 | 0.0593 | 0.0418 | 0.017 | 0.0371 | 0.1566 | 0.5292 | 0.1989 |
DNA片段的检测
为了测试该产品能否检测大肠杆菌gDNA，通过超声处理使大肠杆菌 gDNA片段化，并使用本试剂盒进行检测。
即使是检测片段gDNA，与检测完整gDNA相比，也有着相同的检测灵敏度。低浓度的gDNA中也没有发现灵敏度的下降。 |
高浓度蛋白样品的应用示例 —配合使用残留DNA提取/试剂盒（碘/化钠法） —
向含有人血浆来源γ-球蛋白（75 mg/mL）的样品中分别添加0.1、1、10 ng/mL的大肠杆菌gDNA，使用残留DNA提取/试剂盒（碘/化钠法）提取DNA。然后，使用本产品定量所得DNA，计算加标回收率。
DNA添加量 | 0.1 ng/mL | 1 ng/mL | 10 ng/mL |
检测系统（PCR反应）中的DNA添加量 | 1 pg | 10 pg | 100 pg |
回收率（平均） | 96.9% | 85.7% | 86.9% |
SD | 0.013 | 0.67 | 1.4 |
CV% | 1.3% | 7.8% | 1.6% |
Detection of E. coli-derived genomic DNA | Detecting Internal Control |
|
|
结果显示，即使是含有高浓度蛋白的样品，大肠杆菌gDNA也有着高回收率。 |
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
290-85301 | QCdetect™ Residual DNA Detection Kit for E. coli QCdetect™ 残留DNA检测试剂盒，大肠杆菌用 | 100 tests |
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产品编号 | 产品名称 | 产品规格 |
292-81101 | DNA Extractor® Kit for Residual DNA, CP Method (Sodium Iodide Method) 残留DNA提取/试剂盒（碘/化钠法） | 50 tests |
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