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上海市所在地
产品名称 | 规格 | 货号 |
线粒体活性氧产生速率(ROS)生化检测试剂盒(荧光法) | 100管/96样 | EY-01S151 |
测定意义:
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等,研究表明,机体95%以上的活性氧(ROS)都来自于线粒体,其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。
正常情况下,细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态,细胞内活性氧(ROS)水平维持在较低的生理范围;在病理情况下,细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破,细胞内活性氧水平过多,就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸,使机体出现氧化应激,同时,活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤,导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。
因此,通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。
测定原理:
荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜,在线粒体内被酯酶水解,形成无荧光的DCFH,DCFH迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根据上述原理设计了利用荧光法直接定量检测线粒体ROS产生速率的方法。将荧光强度随时间变化的数据点拟合,线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。
需自备的仪器和用品:
多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。
试剂一:液体×1瓶,室温保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。临用前加入22mL试剂二,现配现用。
试剂四:液体×1支,4℃保存。
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);16000g, 4℃离心20min,取上清液置冰上待测。
3、血清等液体:直接测定。
蛋白激酶(A)荧光共振能量转移法(FRET)、(B)化学发光法(luminometry)、 | 通用型胱(cystine)含量比色法定量检测试剂盒 | MR-VP发酵管 BR 20支 国产/进口 |
组织脂质过氧化氢(H2O2)活性比色法定量检测试剂盒 | SiRNA大量SperfusinX脂质体腹腔法动物转染试剂盒 | 胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂 规格: 250g 用途: 广泛用于细菌的培养,特别用于食品中李斯特氏菌的分离培养(GB/T4789.30-2010和SN/T 0184-2005,I... |
组蛋白H3-K27乙酰化检测试剂盒 | 载玻片细胞钙钠交换体(NCX)蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 肉消化物 2型 规格: 25kg 用途: 用于培养基、生物发酵的原材料 |
组织基质金属(MMP-10)活性荧光定量检测试剂盒 | 组织硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量检测试剂盒 | 李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础 250(g) incubation media 李氏菌增菌肉汤(LB1,LB2)基础 250(g) |
LAMBDA噬菌体培养试剂盒 | 细菌尿肉汤 | MR-VP培养基 用于大肠杆菌的甲基红和VP试验(SN标准) incubation media MR-VP培养基 用于大肠杆菌的甲基红和VP试验(SN标准) |
饲料三聚氰胺快速显色定性检测试剂盒(家用型/工业型) | 线粒体活性氧产生速率(ROS)生化检测试剂盒(荧光法)烟草疫霉 支/瓶 | 微生物干燥培养基 |
通用型细胞培养污染性支原体属鉴定16S rDNA | 含酶TSA培养基平板(7cm) 10个/包 用于医药环境监测 | 产毒培养基 Toxin-Producing Medium 250 用于青霉、曲霉的产毒培养 |
CASPASE-5蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 强化梭菌培养基(RCM) 250g 用于梭菌的分离培养 | MUG培养基 MUG-Medium(with Kovacs) 培养基20g+靛基质20m 大肠埃希氏菌快速荧光测定 |
脑组织固着液(Bouin固着液) | 琼脂(不含亚碲酸) 250g 用于的选择性分离培养 | ER培养基 Eriksson Medium 10升 BR |
组织花生四烯酸(arachidonic acid)酶反应比色法定量检测试剂盒 | 特殊蛋白胨/Peptone Special BR 250克 国产/进口 | 大毛霉 细菌肥料 支/瓶 |
(1)按照蛋白浓度计算
活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照样本质量计算
活性单位定义:25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T
=1608×△A÷W
(3)按细胞数量计算
活性单位定义:25℃中每104个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T
=1608×△A ÷细胞数量
(4)按液体体积计算