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Bis-Tris 蛋白预制胶(精准浓度,塑胶板)
¥188Bis-Tris 蛋白预制胶(范围浓度,塑胶板)
¥188Tris-Glycine蛋白预制胶(精准浓度,塑胶板)
¥188Tris-Glycine蛋白预制胶(范围浓度,塑胶板)
¥188Hepes-Tris蛋白预制胶(精准浓度,塑胶板)
¥188Hepes-Tris 蛋白预制胶(范围浓度,塑胶板)
¥188Anti-GFP免疫磁珠
¥1600伴刀豆蛋白A(ConA)磁珠
¥700三色预染蛋白Marker(10-250KD)
¥798RIPA裂解液(弱)
¥158RIPA裂解液(中)
¥158Tris-SDS电泳缓冲液 (粉剂)
¥78产品描述
Bradford 法蛋白定量是基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后, 产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595nm处有大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可通过检测595nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
Bradford蛋白定量试剂盒 | AP12L015 | 500 T | 128 |
产品组分
产品编号 | 产品组成 | 包装规格 |
AP12L015 | Bradford试剂 A | 100 mL |
蛋白标准(5mg/ml BSA) | 1 mL | |
说明书 | 一份 |
保存方法
冰袋运输,Bradford试剂A 2-8°C保存,蛋白标准品-20°C保存,保质期一年。
使用方法
方案一、试管检测
1、试剂准备
(1)取适量5mg/ml蛋白标准,PBS稀释至终浓度为2mg/ml蛋白标准。配制后可立即使用,也可以-20°C长期保存。
(2)稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
表1:BSA标准品配制表
标准品编号 | 稀释液体积μl | 标准品用量μl | 标准品浓度μg/ml |
1 | 0 | 100 | 2000 |
2 | 50 | 150 | 1500 |
3 | 200 | 200 | 1000 |
4 | 200 | 200(从3号管中取) | 500 |
5 | 200 | 200(从4号管中取) | 250 |
6 | 200 | 200(从5号管中取) | 125 |
7 | 200 | 0 | 0 |
(3)取干净的试管,将30μl稀释好的BSA标准品分别加到作好标记的试管中。
(4)取干净的试管,分别加入30μl待测蛋白样品(原液或稀释液),并作好标记,推荐每个样品做2-3 个平行反应。
2、样品孵育及检测
(1)向上一步骤配制的不同浓度的标准品BSA和待测样品试管中各加入1.5ml Bradford蛋白定量试剂,充分混匀,室温放置10分钟。
(2)用分光光度计测定595nm 处的吸光值。
3、制作标准曲线和计算样品浓度
(1)利用Excel或其他软件绘制标准曲线,并计算样品中的蛋白浓度。
(2)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
方案二、微孔检测
1、试剂准备
(1)将按表2稀释好的BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各5μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。推荐每个样品做2-3 个平行反应。
表2:BSA标准品配制表
标准品编号 | 稀释液体积μl | 标准品用量μl | 标准品浓度μg/ml |
1 | 0 | 20 | 2000 |
2 | 10 | 30 | 1500 |
3 | 40 | 40 | 1000 |
4 | 40 | 40(从3号管中取) | 500 |
5 | 40 | 40(从4号管中取) | 250 |
6 | 40 | 40(从5号管中取) | 125 |
7 | 40 | 0 | 0 |
2、样品孵育及检测
(1)每孔加入250μl Bradford蛋白定量试剂,充分混匀,盖上96孔板盖,室温放置10 分钟。
(2)用酶标仪测定595nm处的吸光值。
3、制作标准曲线和计算样品浓度
(1)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
(2)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
注意事项
1、样品中若含有去垢剂会影响检测结果,请试用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒;
2、要得到更为准确的蛋白浓度结果,每个蛋白梯度和样品均需做复孔, 每次均应做标准曲线;
3、需准备 37°C水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计,测定波长为 465-595nm 之间,595nm合适。酶标仪需与 96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时,试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时,应注意防止因水份蒸发影响检测结果。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。