Bradford蛋白定量试剂盒

AP12L015Bradford蛋白定量试剂盒

参考价: 订货量:
128 1

具体成交价以合同协议为准
2024-08-07 08:04:37
1487
属性:
供货周期:现货;规格:500T;货号:AP12L015;应用领域:生物产业;主要用途:通过检测595nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量;
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产品属性
供货周期
现货
规格
500T
货号
AP12L015
应用领域
生物产业
主要用途
通过检测595nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量
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和元李记(上海)生物技术有限公司

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产品简介

Bradford蛋白定量试剂盒基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后, 产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。可通过检测595nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。

详细介绍

Bradford蛋白定量试剂盒

产品描述
  Bradford 法蛋白定量是基于考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合后, 产生蓝色化合物,反应迅速而稳定。反应化合物在465-595nm处有大的光吸收值,化合物颜色的深浅与蛋白浓度的高低成正比关系,因此可通过检测595nm的光吸收值的大小来计算蛋白的含量。
订购信息

产品名称 货号 规格 价格
Bradford蛋白定量试剂盒 AP12L015 500 T 128


产品组分

产品编号 产品组成 包装规格
AP12L015 Bradford试剂 A 100 mL
蛋白标准(5mg/ml BSA) 1 mL
说明书 一份

保存方法
  冰袋运输,Bradford试剂A 2-8°C保存,蛋白标准品-20°C保存,保质期一年。
使用方法

方案一、试管检测
1、试剂准备
(1)取适量5mg/ml蛋白标准,PBS稀释至终浓度为2mg/ml蛋白标准。配制后可立即使用,也可以-20°C长期保存。
(2)稀释BSA标准品:用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
表1:BSA标准品配制表

标准品编号 稀释液体积μl 标准品用量μl 标准品浓度μg/ml
1 0 100 2000
2 50 150 1500
3 200 200 1000
4 200 200(从3号管中取) 500
5 200 200(从4号管中取) 250
6 200 200(从5号管中取) 125
7 200 0 0

(3)取干净的试管,将30μl稀释好的BSA标准品分别加到作好标记的试管中。
(4)取干净的试管,分别加入30μl待测蛋白样品(原液或稀释液),并作好标记,推荐每个样品做2-3 个平行反应。
2、样品孵育及检测
(1)向上一步骤配制的不同浓度的标准品BSA和待测样品试管中各加入1.5ml Bradford蛋白定量试剂,充分混匀,室温放置10分钟。
(2)用分光光度计测定595nm 处的吸光值。
3、制作标准曲线和计算样品浓度
(1)利用Excel或其他软件绘制标准曲线,并计算样品中的蛋白浓度。
(2)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
方案二、微孔检测
1、试剂准备
(1)将按表2稀释好的BSA标准品和待测蛋白样品(原液或稀释液)各5μl分别加到作好标记的96孔板微孔中。推荐每个样品做2-3 个平行反应。
表2:BSA标准品配制表

标准品编号 稀释液体积μl 标准品用量μl 标准品浓度μg/ml
1 0 20 2000
2 10 30 1500
3 40 40 1000
4 40 40(从3号管中取) 500
5 40 40(从4号管中取) 250
6 40 40(从5号管中取) 125
7 40 0 0

2、样品孵育及检测
(1)每孔加入250μl Bradford蛋白定量试剂,充分混匀,盖上96孔板盖,室温放置10 分钟。
(2)用酶标仪测定595nm处的吸光值。
3、制作标准曲线和计算样品浓度
(1)绘制标准曲线,计算样品中的蛋白浓度。
(2)如果所得到的蛋白浓度不在检测范围内,请重新稀释样品后再次测定。
注意事项

1、样品中若含有去垢剂会影响检测结果,请试用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒;
2、要得到更为准确的蛋白浓度结果,每个蛋白梯度和样品均需做复孔, 每次均应做标准曲线;
3、需准备 37°C水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计,测定波长为 465-595nm 之间,595nm合适。酶标仪需与 96孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时,试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时,应注意防止因水份蒸发影响检测结果。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


 

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