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EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
EB病毒转化的人B淋巴细胞;KMY0928价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞系来源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明细胞库通过EB病毒转化的方法建立。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
传代方法 1:2传代;5-6天一次
传代情况 P2
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
Mebolazine (1 mg)Dimethazine|Roxilon; [(2α,5α,17β)-17β-hydroxy-2α,17-dimethylandrostan-3-ylidene]hydrazone, 17β-hydroxy-2α,17-dimethyl-androstan-3-one
Hydromorphone CRM (2 mL)Exalgo|Jurnista|NSC 19046|Novolaudon; 4,5α-epoxy-3-hydroxy-17-methyl-morphinan-6-one
Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format (1 mg)Streptavidin:SureLight APC Protein Assay Format
生物素标记*基化组蛋白H3K4多肽Biotinylated Trimethyl Histone H3K4 Peptide (200 ul)
Z-DEVD-FMK, Caspase-3抑制剂(氟甲基酮)Caspase-3 Inhibitor Z-DEVD-FMK
Z-VAD-FMK, Caspase-Family抑制剂(氟甲基酮)Z-VAD-FMK
AZD-0530Saracatinib (AZD0530)
5-[(2-hydroxy-5,8-dihydronaphthalen-1-yl)methyl]-6-phenyl-2-thioxo-2,3-dihydropyrimidin-4(1H)-one; NSC-112546Cambinol
4-(Acetylamino)-N-(2-aminophenyl)benzamide, Acetyldinaline, GCI-994
蛋白酶抑制剂套装II, EZBlockEZBlock Protease Inhibitor Cocktail II
FHRRIKAHeparin-Binding Peptide III
5-Pioglitazone
2-UNC0638
4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenyl-polyethylene glycol, t-Octylphenoxypolyethoxyethanol, Polyethylene glycol tert-octylphenyl etherTriton X-100, MegaPure Detergent, 10% Solution
T-47D(人腺管细胞)5×106cells/瓶×2
SK-MEL-1(人肤黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2
ProteinShow-G250蛋白快速染色试剂1000ml国产gersion
B16-F10(小鼠肤黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2
Molt-4(人急性淋巴母细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2gersion
P815(小鼠肥大细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HuH-7人肝细胞
C6(大鼠胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2
eECL Western Blot Kit/高灵敏度化学发光检测试剂盒250ml25ml、100ml、250ml
小鼠神经干细胞
ARPE-19(人视网膜上细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白血病细胞英文名称:L1210
1640培养基/1640 Medium/RPMI 1640含L-谷氨酰胺,不含碳酸氢钠10升国产/进口
人食管细胞英文名称:CaEs-17
MR-VP培养基/MR-VP试验用培养基/缓冲葡萄糖肉汤/葡萄糖磷酸盐肉汤/MR VP Broth肠杆菌科细菌的甲基红和VP试验250克国产/进口
人结直肠腺细胞英文名称:HCT-15
蛋白胨/PeptoneBR250克国产/进口
2-(3,4-Dimethoxybenzenesulfonylamino)-4-(3-Nitrophenyl)-5-(Piperidin-1-yl)MethylthiazoleJM6
3,4-Methylenedioxy-β-nitrostyreneMDBN
4-HNE4-Hydroxynonenal