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昆虫卵巢细胞;SF9价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
昆虫卵巢细胞;SF9价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 圆形
生长特性 贴壁/悬浮生长
特征特性 该细胞系源于雌性草地贪夜蛾蛹的卵巢组织,可以用于复制杆状病毒表达载体。
培养条件 Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate) 10%FBS
传代方法 1:5或更多传代;2~3天换液1次。
传代情况 P36
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
杨氏柠檬酸杆菌 Citrobacter youngae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉变种 Aspergillus awamori var.
大丽轮枝菌 Verticillium dahliea Kleb
HBE(人支气管上皮样细胞)5×106cells/瓶×2
柄木霉
人视网膜色素上皮细胞*培养基100mL
Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞
屎肠球菌 Enterococcus faecium
香菇 Lentinula edodes
CNE(人鼻咽细胞)5×106cells/瓶×2
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
链霉菌 Streptomyces sp.
人膀胱上皮细胞*培养基100mL
RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeForsythoside B 连翘脂苷B 81525-13-5
4-Fluoro-7-nitrobenzofurazan 4--7-基-2,1,3-并氧杂恶二唑 29270-56-2
Benzamidine hydrochloride 苄脒酸 1670-14-0
3-DODECYLTHIOPHENE 3-十二烷基噻吩 104934-52-3
Bromopentafluorobenzene 溴五 344-04-7
Cryptochlorogenic acid 隐绿原酸 905-99-7
1 2 4-TRIMETHYLPYRAZOLIUM METHYLSULFATE 1,2,4-三基吡唑硫酸乙酯 856614-13-6
3,3'-Dimethylbenzidine dihydrochloride 酸邻联胺 612-82-8
1,6-Dibromohexane 1,6-二溴己烷 629-03-8
4-Amino-6-chlorobenzene-1,3-disulfonamide 5--2,4-二磺酰胺基胺 121-30-2
9,10-Diphenylanthracene 9,10-二基蒽 1499-10-1
N-ACRYLOXYSUCCINIMIDE N-丙酰氧基琥珀酰亚胺 38862-24-7
NA 化卵黄琼脂
MALONIC ACID DISODIUM SALT 丙二酸 141-95-7
Aluminum nitrate 酸铝 13473-90-0
Alginic acid 海藻酸 9005-32-7
TRIFLUOROMETHANESULFONIMIDE 双三基磺酰亚胺 82113-65-3
Methyl 5-chloropyrazine-2-carboxylate 5-吡嗪-2-羧酸酯 33332-25-1
1,4-Dioxaspiro[4.5]decan-8-one 1,4-环己二单乙二醇缩 4746-97-8
N,N'-Bis(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)-L-histidine N,N'-双(9-芴氧羰基)-L-组氨酸 98929-98-7
Methyl 4-fluorobenzoate 对酸酯 403-33-8