昆虫卵巢细胞；Sf21说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称 昆虫卵巢细胞；Sf21说明书
形态特性  圆形，多形
生长特性 悬浮生长
特征特性  该细胞系源于雌性草地贪夜蛾蛹的卵巢组织，是Sf9细胞的克隆系，可以用于昆虫病毒的基础研究和复制杆状病毒表达载体。 
培养条件  Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C11
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 同工酶鉴定
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺细胞 Human
鼠李糖杆菌 Lactobacillus rhamnosus
苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis
SW 1353(人骨肉瘤细胞)5×106cells/瓶×2
沟肠杆菌 Enterobacter cloacae
牛粪枝孢 Cladosporium stercorarium
胶原酶(含100mL酶解缓冲液)10mL
小鼠神经干细胞（EGFP标记） Mouse
异常毕赤酵母 Pichia anomala
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
HPAC(人胰腺腺泡上皮)5×106cells/瓶×2
瑞士杆菌 Lactobacillus helveticus
刺孢吸水链霉菌北京变种 Streptomyces hygrospinosus var. beigingenis
大鼠肾小管平滑肌细胞*培养基100mL
柠檬串珠菌 Leuconostoc citreum
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
BC-019(人腺细胞)5×106cells/瓶×2
植物杆菌 Lactobacillus plantarum
根瘤菌 Rhizobium sp.CUPROUS TRIFLUOROMETHANESULFONATE TOLUENE COMPLEX    三烷磺酸亚铜络合物（2:1）    48209-28-5
Disodium pytophosphate    焦磷酸二氢二    7758-16-9
2-Methyl-4,6-dinitrophenol    4,6-二基邻酚    534-52-1
Bis(4-amino-2-chloro-3,5-diethylphenyl)methane    4,4'-亚基双(3--2,6-二乙基胺)    106246-33-7
FETAL BOVINE SERUM USA ORIGIN    胎牛血清    
2,8-BIS(TRIFLUOROMETHYL)-4-BROMOQUINOLINE    4-溴-2,8-二(三基)喹啉    35853-45-3
N,N,N',N'-TETRAKIS(2-HYDROXYETHYL)ETHYLENEDIAMINE    N,N,N',N'-四(2-羟乙基)乙    140-07-8
2-Chloro-4-hydroxypyridine    2--4-羟基吡啶    17368-12-6
METHYL 3-MORPHOLINOPROPIONATE    4-啉丙酸酯    33611-43-7
Tetrahydropyran    四氢吡喃    142-68-7
3,5-Dichlorobenzylamine    3,5-二苄胺    39989-43-0
Ethyl (4-methylthiophenyl)acetate    4-硫基乙酸乙酯    14062-27-2
2-N-HEXYLCYCLOPENTANONE    2-己基环    13074-65-2
L-Asparagine tert-butyl ester    L-天冬酰胺叔丁酯    25456-86-4
4-Nitrotoluene    对基    99-99-0
tert-Butyl carbazate    叔丁氧羰基肼    870-46-2
2-Methylpyrimidine    2-基嘧啶    5053-43-0
Protopine    原阿片    130-86-9