白鲢尾鳍细胞系；SCF说明书【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。

细胞名称白鲢尾鳍细胞系；SCF说明书
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  白鲢尾鳍细胞由长江水产所建立鉴定，用于白鲢尾鳍鱼基础研究和病毒疾病防治研究。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C15
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 同工酶鉴定
染色体 
使用权限 A类

细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

植物杆菌 Lactobacillus plantarum
黑色链霉菌 Streptomyces niger
大鼠骨髓基质细胞*培养基100mL
鞘氨醇杆菌属 Sphingobacterium sp.
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
RBL-2H3(大鼠嗜碱性细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2
杆菌属 Lactobacillus sp.
根瘤菌 Rhizobium sp.
Tris(三羟甲基氨基甲烷)500g国产
酸球菌亚种 Lactococcus lactis subsp. lactis
冬拟多孔菌
枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis
HBL-100(人整合SV40基因的腺上皮细胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌霍氏亚种 Lactococcus lactis subsp. hordniae
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Saos-2，人成骨肉瘤细胞
戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes
苏云金芽胞杆菌苏云金变种 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis
中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mLParaformaldehyde    多聚    30525-89-4
1-Bromo-3,5-dimethyladamantane    1-溴-3,5-二基金刚烷    941-37-7
Ethylenzene    乙基    100-41-4
5-Azacytidine    5-氮胞苷    320-67-2
2-Ethylimidazole    2-乙基咪唑    1072-62-4
2'-DEOXY-5-FLUOROCYTIDINE    5-脱氧胞苷    10356-76-0
(S)-(-)-2,2'-BIS(DI-P-TOLYLPHOSPHINO)-1,1'-BINAPHTHYL    (S)-(-)-2, 2-双（二对基膦）-1,1-二联萘    100165-88-6
N-ACETYL-L-TYROSINE ETHYL ESTER    N-乙酰-L-酪氨酸乙酯一水物    840-97-1
2-Acetamidoacrylic acid    2-乙酰氨基丙酸    5429-56-1
2,5-Dibromoterephthalic acid diethyl ester    2,5-二溴对二酸二乙酯    18013-97-3
Levodopa    左旋多巴    59-92-7
5-BROMOPYRIDINE-3-SULFONYL CHLORIDE    5-溴吡啶-3-磺酰    65001-21-0
Cellulose diacetate    二醋酸纤维素    9035-69-2
L-Threonic acid calcium salt    L-苏糖酸钙    70753-61-6
2-Amino-5-chloro-3-methylbenzoic acid    2-氨基-5--3-基酸    20776-67-4
4-Ethoxybenzoic acid    4-乙氧基酸    619-86-3
N-Hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide    N-羟基-5-降冰片-2,3-二酰亚胺    21715-90-2